10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2017.07.002
高良姜素通过抑制Wnt/β-链蛋白信号通路诱导胶质瘤细胞凋亡
目的 探讨高良姜素对胶质瘤细胞体外增殖和凋亡的影响. 方法 (1)将胶质瘤细胞U251和U87分为空白对照组、DMSO组及高良姜素100、200、300、400 μmol/L组,使用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法观察对胶质瘤细胞增殖情况;(2)通过Hoechest染色观察在不同浓度(0、100和200 μmol/L)高良姜素作用下胶质瘤细胞U251和U87凋亡情况;(3)使用流式细胞仪检测胶质瘤细胞U251和U87在不同浓度(100和200 μmol/L)高良姜素作用下凋亡情况;(4)应用Western blotting技术检测凋亡相关蛋白β-链蛋白、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白基因(Bax)、活化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(活化caspase-3、活化caspase-9)、多聚腺苷二磷酸核糖基聚合酶(PARP)蛋白等在胶质瘤细胞U87和U251的表达. 结果 (1)在100、200、300、400 μmol/L浓度的高良姜素作用下,体外培养的胶质瘤细胞U251和U87的增殖被明显抑制,并呈现一种量效关系.100、200、300、400 μmol/L高良姜素作用于胶质瘤细胞U251和U87 24h时,其半数抑制浓度分别为281、321、276、229 μmol/L及289.4、261.1、247.4、225.3 μmol/L.(2)胶质瘤细胞U251和U87随着高良姜素浓度增加(0、100和200 μmol/L),凋亡率也相应增加,差异具有统计学意义(P<0.05).(3)流式细胞仪检测细胞凋亡发现了同样的结果.(4)0、100、200 μmol/L浓度高良姜素作用下,胶质瘤细胞U87和U251的Wnt/β-链蛋白表达依次减少,Bcl-2依次减少,Bax依次增加,活化caspase-3、活化caspase-9表达依次增多,活化PARP表达依次增加,差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 高良姜素能抑制胶质瘤细胞U251和U87增殖,并通过Wnt/β-链蛋白信号通路及线粒体途径诱导其凋亡.
神经胶质瘤、Wnt/β-链蛋白信号通路、高良姜素、细胞凋亡、线粒体途径
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R730.264(肿瘤学)
国家自然科学基金81271391、30840082National Natural Science Foundation of China 81271391,30840082
2017-09-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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