腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统在Cfos启动子调控下对胶质瘤细胞的杀伤作用

摘要：

目的 构建人Cfos启动子调控的单纯疱疹病毒(HSV)-胸苷激酶(TK)自杀基因重组腺病毒载体,观察其介导的HSV-TK/更昔洛韦(GCV)系统对胶质瘤细胞的杀伤作用. 方法 构建重组腺病毒载体Ad-Cfos-TK-IRES-hr绿色荧光蛋白(GFP)、Ad-CMV-TK-IRES-hrGFP,转染至HEK293细胞获得重组腺病毒Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP、Ad-CMV-TK-IRES-hrGFP,荧光计数法检测病毒滴度;将病毒感染U251、U87细胞,荧光显微镜下观察GFP的表达.将病毒感染U251、U87细胞,24 h后加入1000、100、10、1、0.1、0.01、0μmol/L GCV作用48 h,CCK-8法检测各组细胞抑制率. 结果 成功构建重组腺病毒载体pDC315-CMV-TK-IRES-hrGFP、pDC315-CFOS-TK-IRES-hrGFP.荧光计数法检测显示2种腺病毒滴度均达1×1010 PFU/mL.在病毒感染复数(MOI)为100、GCV浓度为1、10、100、1000 μmol/L时,转染Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP组U251细胞抑制率分别为(24.18±6.01)％、(30.39±9.67)％、(57.07±9.29)％、(94.50±3.48)％,转染Ad-Cfos-TK-IRES-hrGFP组U87细胞细胞抑制率分别为(9.78±2.24)％、(86.33±5.06)％、(98.48±0.79)％、(98.76±0.93)％. 结论 腺病毒介导的HSV-TK/GCV系统在Cfos启动子调控下在体外可以有效杀伤胶质瘤细胞.

关键词：神经胶质瘤、基因治疗、腺病毒、Cfos启动子

所属期刊栏目：14

分类号：R730.264(肿瘤学)

资助基金：深圳市南山区科技计划2012017

在线出版日期：2015-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：558-562