Delta样蛋白1在垂体腺瘤细胞株中的表达及生物学功能研究

摘要：

目的:探讨Delta样蛋白1(DLK1)在垂体腺瘤细胞株中的表达水平及生物学功能。方法:体外培养垂体腺瘤GH3、MMQ和ATT20细胞，分为实验组和对照组，实验组细胞分别给予抗DLK1抗体1 μg/ml和5 μg/ml，对照组细胞给予等体积的二甲基亚砜，共培养24、48及72 h。采用蛋白质免疫印迹实验检测各个细胞株DLK1的水平和谱系来源，细胞增殖实验检测细胞的活力，酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞的分泌能力[GH3细胞：GH和胰岛素样生长因子(IGF-1)，MMQ细胞：催乳素(PRL)，ATT2细胞：促肾上腺皮质激素(ACTH)]，细胞免疫荧光实验和蛋白质免疫印迹实验检测抗DLK1抗体对GH3细胞表达PIT1蛋白水平的影响。结果:蛋白质免疫印迹实验结果证实，GH3和MMQ细胞为POU结构域转录因子1(POU1F1)谱系细胞，DLK1表达水平高；ATT20细胞为T盒转录因子19(TBX19)谱系细胞，DLK1表达水平低。与抗DLK1抗体共培养48 h，仅GH3细胞5 μg/ml实验组的细胞活力高于对照组(
P＝0.017)；共培养72 h，GH3细胞1 μg/ml、5 μg/ml实验组(均
P<0.05)及MMQ细胞5 μg/ml实验组(
P＝0.041)的细胞活力高于对照组；ATT20细胞的实验组与对照组所有时间点的细胞活力差异均无统计学意义(均
P>0.05)。与抗DLK1抗体培养24、48、72 h，GH3细胞对照组培养上清中GH含量分别为(8.8±0.6)、(10.4±0.8)及(13.2±0.9)ng/ml，5 μg/ml实验组分别为(6.7±0.7)、(6.1±0.4)及(4.7±0.4)ng/ml，各时间点两组比较差异均有统计学意义(均
P<0.001)；GH3细胞对照组3个时间点培养上清中IGF-1的含量分别为(12.5±0.7)、(14.6±1.0)及(15.9±1.1)ng/ml，5 μg/ml实验组分别为(10.9±0.7)、(11.8±0.8)及(8.3±0.7)ng/ml，48 h和72 h时间点两组的差异均有统计学意义(均
P<0.05)；与对照组相比，ATT20细胞5 μg/ml实验组各时间点分泌ACTH的量及MMQ细胞分泌PRL的量差异均无统计学意义(均
P>0.05)。细胞免疫荧光实验和蛋白质免疫印迹实验均显示，与抗DLK1抗体共培养24 h，GH3细胞5 μg/ml实验组的DLK1和PIT1蛋白水平均明显低于对照组(均
P<0.01)。
结论:DLK1在POU1F1谱系垂体腺瘤细胞株高表达，在TBX19谱系垂体腺瘤细胞株低表达。抗DLK1抗体抑制POU1F1谱系GH3细胞分泌GH和IGF-1，促进GH3细胞增殖，POU1F1可能是DLK1的下游靶点分子。

关键词：垂体肿瘤、细胞、体外培养、Delta样蛋白1、POU结构域转录因子1

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在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：282-287