高表达RNA结合模序蛋白5促进胶质瘤A172细胞凋亡

摘要：

目的 探讨RNA结合模序蛋白5(RBM-5)的高表达促进A172胶质瘤细胞株凋亡的机制.方法 回顾性纳入重庆医科大学附属第一医院神经外科2015年8月至2017年6月手术切除的19例脑胶质瘤标本,采用免疫组织化学染色方法检测RBM-5的表达.采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测RBM-5在人脑胶质瘤细胞株A172、U87、U251及SHG-44的表达.构建稳定感染高表达RBM-5慢病毒的A172细胞株,采用qRT-PCR验证RBM-5在3组细胞株中(分别为实验组、阴性对照组和空白对照组)mRNA水平的表达;进一步采用蛋白质印迹法检测RBM-5、BAX、Bcl-2和Cleaved Caspase-9在3组细胞株中的表达;最后采用流式细胞术检测3组细胞株的凋亡情况.结果 免疫组织化学染色结果显示,RBM-5在低级别胶质瘤(WHO Ⅰ～Ⅱ级,A值分别为0.021±0.011、0.004 ±0.002)中的表达高于高级别胶质瘤(WHOⅢ～Ⅳ级,A值均为0.000±0.000)(F=7.410,P＜0.05).qRT-PCR结果显示,RBM-5在A172、U251、U87和SHG-44细胞株中的表达依次为0.494±0.186、1.168 ±0.775、2.437±1.281和3.547±1.177,其中RBM-5在A172中表达最低,在SHG-44中表达最高(F=6.023,P＜0.05).蛋白质印迹实验证实,高表达RBM-5的A172细胞株中RBM-5 (202.854±6.573)、BAX(208.000±10.324)和Cleaved Caspase-9(112.811±1.684)的表达均较阴性对照组(分别为117.156 ±0.357、152.105±2.819和62.873±1.313)和空白对照组(分别为119.283±1.356、153.159 ±0.571和73.281 ±4.480)高;而Bcl-2的表达(60.420±1.986)均较阴性对照组(107.157 ±2.056)和空白对照组(99.563±3.997)低.流式细胞术结果显示,实验组细胞凋亡率[(20.88 ±0.72)％]高于阴性对照组[(9.51±0.57)％,P＜0.05]和空白对照组[(9.49±0.49)％,P＜0.05].结论 在A172胶质瘤细胞株中高表达的RBM-5可能通上调BAX和CleavedCaspaseO蛋白、下调Bcl-2蛋白促进其凋亡,提示RBM-5可能成为脑胶质瘤临床治疗的新靶点.

关键词：神经胶质瘤、细胞凋亡、RNA结合模序蛋白5

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在线出版日期：2018-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：836-840