10.3760/cma.j.issn.1001-2346.2014.09.024
Flt-1基因对BT325细胞VEGF蛋白表达及细胞增殖的影响
目的 探讨Flt-1基因对BT325胶质瘤细胞VEGF蛋白表达及细胞增殖的影响.方法 从人脐静脉内皮细胞中提取总RNA,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增Flt-1基因片段,基因重组技术将Flt-1基因片段插入真核表达载体pEGFP-C1中,双酶切及DNA测序鉴定pEGFP-C1-Flt-1重组质粒.pEGFP-C1-Flt-1重组质粒转染BT325胶质瘤细胞,转染后72hELISA法检测培养上清液中VEGF含量,MTT法检测细胞的增殖情况.结果 RT-PCR方法证实从人脐静脉血内皮细胞中成功获得1 384 bp Flt-1基因片段;经双酶切分析和DNA测序鉴定表明重组质粒pEGFP-C1-Flt-1构建成功;ELISA检测发现,BT325细胞被转染后72 h VEGF含量转染组为(56.3±41.2) pg/ml,空载体转染组为(95.5±35.3) pg/ml(P<0.05);MTT法检测发现,转染组和空载体转染组的生存率分别为(42.6±3.7)%和(92.8±6.6)%(P<0.05).结论 Flt-1基因可抑制BT325细胞VEGF的蛋白表达,抑制细胞增殖.
Flt-1基因、基因重组、BT325细胞
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R781.3;R543;R285.5
北京市自然科学基金;北京市科技新星计划
2014-10-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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