MiR-195对胶质瘤细胞U251增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨miR-195过表达对人脑胶质瘤细胞系U251增殖和凋亡的影响及其机制.方法 实验分为Blank组、NC组和miR-195组,Blank组处理时仅加等体积PBS,后两组通过脂质体将无义序列或miR-195模拟物转染至U251,RT-PCR检测转染前后miR-195表达水平；用CCK-8法计算细胞生长抑制率和平板克隆形成实验评价细胞的增殖能力；流式细胞仪分析细胞凋亡和周期；Hoechst33342和PI双染法检测原位细胞凋亡坏死；利用生物信息学技术预测miR-195的靶基因,Western blot检测Bcl-2的蛋白水平.结果 RT-PCR测得转染后miR-195表达水平提高6倍左右；细胞生长抑制率和平板克隆形成结果分别显示过表达miR-195可以抑制U251生长和克隆形成能力(与NC组比较P＜0.001)；流式细胞仪检测细胞凋亡和Hoechst33342和PI双染法结果示miR-195组细胞凋亡和坏死比例明显增高(与Blank组及NC组相比P＜0.001)；流式细胞仪检测细胞周期发现miR-195能够阻滞U251在Go/G1期,与Blank组及NC组相比P＜0.05；TargetScan预测发现Bcl-2是miR-195的靶基因；Western blot检测示过表达miR-195可以下调Bcl －2的表达,与Blank组及NC组相比P＜0.05.结论 过表达miR-195可以抑制胶质瘤细胞U251的增殖,促进胶质瘤细胞凋亡和坏死并产生Go/G1期阻滞,可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点.

关键词：神经胶质瘤、MiR-195、增殖、凋亡、Bcl-2

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资助基金：山西省基础研究计划青年科技研究基金项目2012021035-4;山西省科技攻关项目20110313011-3

在线出版日期：2013-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：473-477