下调Notch-1基因表达抑制胶质母细胞瘤的增殖活性研究

摘要：

目的 应用siRNA下调胶质母细胞瘤TJ-905细胞株Notch-1基因抑制肿瘤增殖活性.方法 实验设以Notch-1为基因靶点的siRNA1、siRNA2、siRNA3转染组、阴性对照组和空白对照组,采用OligofectamineTM2000二次转染方法将 siRNA转移到细胞内.实时荧光定量PCR检测siRNA对Notch-1基因表达的抑制作用,筛选出最优siRNA序列用于后续研究;四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖活性;使用Notch-1 siRNA或阴性siRNA转染的TJ-905细胞悬液注射裸鼠腋下,观察移植瘤生长情况,比较肿瘤体积,观察3周后处死动物,切片行HE染色鉴定.结果 (Ⅰ)siRNA明显抑制Notch-1 mRNA的表达水平,空白对照组、阴性对照组、siRNA1、2、3转染组Notch-1 mRNA 表达率分别为1.00±0.07、1.04±0.05、0.11±0.02、0.12±0.01、0.77±0.03,siRNA1为最优序列.(2)siRNA1转染组细胞增殖活性显著降低.(3)接种Notch-1 siRNA1转染的TJ-905细胞裸鼠肿瘤生长速度明显低于接种阴性转染的TJ-905细胞裸鼠,裸鼠处死后观察肿瘤体积:Notch-1 siRNA1转染组为(748.3±154.3)mm3,阴性转染组为(1739.2±249.7)mm3,病理切片HE染色证明为多形性胶质母细胞瘤.结论 化学合成的靶向Notch-1基因的siRNA可以显著地下调Notch-1基因表达水平,抑制肿瘤增殖活性.为进一步进行胶质瘤的基因治疗研究奠定基础.

关键词：神经胶质瘤、Notch-1基因、小干扰RNA、裸鼠

所属期刊栏目：27

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金Y2008C58

在线出版日期：2011-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：140-143