RNA干扰敲低Dicer对胶质瘤细胞恶性表型的影响

摘要：

目的 观察应用RNA干扰(RNAi)技术敲低Dicer酶后,在体外对U251人胶质瘤细胞生物学特征的影响.方法 构建针对Dicer基因的小分子干扰RNA重组腺病毒表达载体(rAd-Dicer)转染至U251细胞.应用RT-PCR检测Dicer mRNA水平的变化,应用免疫荧光和Western blot方法检测Dicer基因在蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析比较.应用MTT法、流式细胞术和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后生物学行为的变化.结果 rAd-Dicer可显著抑制U251细胞Dicer基因的表达;与正常对照组(control)和阴性对照组(rAd-HK)比较,Western blot分析结果显示p-AKT,MMP2/9,PCNA,Cyclin a,VEGF,CD34功能蛋白在rAd-Dicer转染组细胞中表达明显上调;细胞周期结果表明rAd-Dicer转染组进入S期的细胞数增加了 14.1%～15.3%,MTT和Transwell实验结果显示rAd-Dicer转染组细胞增殖速率和体外侵袭能力显著增强.结论 敲低Dicer酶表达后,U251细胞表型具有更为恶性转化的倾向,由此初步推测全面抑制细胞microRNAs表达有可能促进肿瘤生成.

关键词：神经胶质瘤、microRNA、Dicer、RNA干扰、生物学表型

所属期刊栏目：27

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：教育部新世纪优秀人才支持计划资助项目NCET-07-0615;国家自然科学基金30772231;天津市科技计划项目资助项目09JCZDJC17600;天津市卫生局科学基金09KZ112

在线出版日期：2011-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：131-135