糖原合成酶激酶3β活性增加参与β淀粉样蛋白31～35诱导的HT22海马神经细胞Bmal1表达降低

摘要：

目的 探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)在β淀粉样蛋白31～35(Aβ31～35)引起小鼠海马HT22神经细胞Bmal1基因/蛋白表达降低中的作用.方法 采用小鼠海马神经细胞HT22作为实验对象,将HT22细胞按随机数字表法分为对照组、Aβ31～35处理组、LiCl+Aβ31～35处理组.以1％血清饥饿1h来诱导细胞同步化(昼夜时间0,即CT0).采用细胞增殖-毒性检测法检测细胞存活率;采用实时荧光定量PCR法检测上述各组细胞CT4、CT8、CT12、CT16、CT20、CT24时间点Bmal1基因的表达水平;采用Western印迹方法检测各组GSK3β表达情况及BMAL1蛋白表达水平.结果 Aβ31～35诱导HT22细胞Bmal1 mRNA及BMAL1蛋白水平在CT20时间点较对照组显著降低(Bmal1 mRNA:分别为0.38±0.06与0.83±0.08,t=4.549,P=0.001;BMAL1蛋白:分别为0.67±0.04与1.00±0.04,t=5.943,P＜0.001).与对照组相比,Aβ31～35引起HT22细胞GSK3β活性增加,表现为GSK3βSer9位点(GSK3βS9)磷酸化水平较对照组显著降低,磷酸化GSK3βs9与GSK3β比值下降(分别为0.66±0.08与1.02±0.14,t=2.217,P=0.025);Aβ31～35引起HT22细胞存活率显著降低(分别为71.85％±6.20％与98.14％±2.68％,t=3.891,P=0.006),GSK3β抑制剂LiC1预处理后有效逆转Aβ31～35诱导的HT22细胞存活率下降(LiCl±Aβ31～35处理组与Aβ31～35处理组分别为90.74％±5.74％与71.85％±6.20％,t=3.412,P=0.010);LiCl预处理可以明显逆转Aβ31～35所致CT20时间点Bmal1 mRNA及BMAL1蛋白水平降低(LiCl+Aβ31～35处理组与Aβ31～35处理组Bmal1 mRNA分别为:0.72±0.05与0.38±0.06,t=4.378,P=0.001;BMAL1蛋白分别为:0.90±0.04与0.67±0.04,t=4.052,P=0.002).结论 GSK3β活性增加参与Aβ31～35引起的HT22细胞Bmal1基因/蛋白表达降低.

关键词：淀粉样蛋白、糖原合成酶激酶3、Bmal1基因、HT22细胞

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资助基金：National Natural Science Foundation of China ;Fund for the Scientific Activities of Selected Returned Overseas Professionals in Shanxi Province ;2018年度山西省留学人员科技活动项目重点项目王晓晖

在线出版日期：2020-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：96-102