重组微小腺病毒载体对 Wilson 病患者皮肤成纤维细胞铜代谢的影响

摘要：

目的：探讨重组微小腺病毒载体（miniAd-ATP7B-GFP）对高铜孵育下的Wilson 病患者皮肤成纤维细胞铜代谢的影响。方法构建含人ATP7B基因的微小腺病毒载体；检测8例Wilson病患者突变基因；原代培养8例Wilson病患者与8名健康对照的皮肤成纤维细胞，使用基本培养液及铜浓度为22.3（C1）、89.2（C2）、156.1（C3）、245.3μmol／L（C4）培养液分别孵育2组细胞72 h，检测铜与蛋白含量。向Wilson病患者成纤维细胞分别转染miniAd-ATP7B-GFP（miniAd-ATP7B-GFP组）与空载体（ miniAd-GFP组），设立Wilson病未转染组及健康组做对照，用C4浓度培养液孵育4组细胞72、96 h，后检测各组细胞铜与蛋白含量。结果8例Wilson病患者检出5种突变基因，基本培养液及C1～C3组Wilson病患者与健康人铜／蛋白比值差异无统计学意义，C4组Wilson病患者[（1871.6±209.2） ng／mg]与健康人[（1267.2±188.3） ng／mg]铜／蛋白比值差异有统计学意义（ t＝6.075，P＜0.01），C3[（816.3±113.9） ng／mg]、C4组较基本培养液组[（159.2±38.6） ng／mg]差异有统计学意义（患者组χ2＝31.493，健康组χ2＝30.708，均P＜0.01）。96 h各组铜／蛋白比值均高于72 h组，96 h [（2071.0±171.8） ng／mg]、72 h[（1495.5±161.4） ng／mg]的miniAd-ATP7B-GFP组铜／蛋白比值与Wilson病未转染组[96 h（2731.2±188.7） ng／mg、72 h（1901.7±219.5） ng／mg]相比差异有统计学意义（72 h组F＝20.130，96 h 组F＝51.496，P＜0.01），与健康组比差异亦有统计学意义。结论MiniAd-ATP7B-GFP对高铜孵育下的Wilson病患者皮肤成纤维细胞的铜代谢有部分改善作用。

关键词：肝豆状核变性、皮肤、成纤维细胞、铜、体外研究技术

分类号：S85;R39

在线出版日期：2016-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：102-107