细胞外信号调节激酶参与调节鱼藤酮介导的嗜铬细胞瘤细胞损伤

摘要：

目的 探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)1/2在鱼藤酮介导的多巴胺能细胞损伤中的信号调节机制.方法 鱼藤酮处理体外培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞株,建立帕金森病细胞模型.采用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法检测鱼藤酮对PC12细胞活力的影响,免疫组织化学方法观察鱼藤酮对磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达的影响,免疫印迹法研究p-ERK1/2蛋白表达随时间变化的趋势,并检测ERK1/2上游激酶抑制剂PD98059对鱼藤酮诱导ERK1/2磷酸化及细胞活力的影响.结果 PC12细胞随鱼藤酮(5 μmol/L)作用时间的增加,细胞吸光度(%)出现下降,1 h降至对照组的75.46±5.47,2、4、8 h分别降至70.42±1.94、65.23±0.96、59.04±2.85,24 h降至29.64±1.63,各时间点差异有统计学意义(F=143.014,P=0.000);与对照组(100.00±2.89)比较,q值分别为17.07、20.58、24.19、28.50、48.95,均P<0.01.镜下观察显示鱼藤酮处理的细胞中有明显p-ERK1/2聚集;免疫印迹实验结果显示,随鱼藤酮作用时间的增加,p-ERK1/2出现双相表达升高,30 min开始升高,1～2 h达高峰,4 h转而降低,8 h又重新升高,16 h后基本消失;PD98059明显抑制鱼藤酮导致的ERK1/2磷酸化,明显减低了细胞损伤的程度.结论 在鱼藤酮介导的多巴胺神经元损伤中呈现ERK1/2双相活化,该过程可能在调控PD多巴胺能细胞损伤中起重要作用.

关键词：PC12细胞、帕金森病、丝裂原活化蛋白激酶3、鱼藤酮

所属期刊栏目：42

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：湖北省科技厅自然科学基金2006ABA130;武汉市科技局重点攻关计划20066002100

在线出版日期：2010-02-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：771-775