10.3877/cma.j.issn.1674-0807.2019.03.006
碧萝芷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移和转移的影响
目的 探讨抗氧化剂碧萝芷对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用,并对观察碧萝芷对MCF-7细胞的转移和迁移功能的影响.方法 用10、20、40μg/ml的碧萝芷处理乳腺癌MCF-7细胞作为实验组,空白对照组只加入DMEM培养基(无血清),MTT法在处理细胞后24、48、72 h于波长490 nm处测定各组吸光度值;用流式细胞仪检测细胞凋亡率;用 β-半乳糖苷酶染色法检测MCF-7细胞衰老率;用Transwell小室法分别检测各浓度碧萝芷对乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响;用Western blot法分别检测乳腺癌MCF-7细胞衰老相关蛋白P53、P21、P16、P27、E2F1以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9的表达.细胞迁移、侵袭数目及各种蛋白的表达水平比较采用单因素方差分析,吸光度值比较采用重复测量的方差分析,两两比较采用LSD法.结果 MTT结果显示,在处理乳腺癌MCF-7细胞24、48、72 h后,各组吸光度值比较,差异有统计学意义(F=149.439,P<0.001),在不同时间点之间比较,差异有统计学意义(F=27.922,P<0.001);分组与时间点之间存在交互作用(F=18.466,P<0.001).流式细胞仪检测结果显示:空白对照组及10、20、40μg/ml碧萝芷组的细胞凋亡率分别为(2.36±0.27)% 、(6.44±1.43)% 、(7.52±2.09)% 和(11.68±1.65)%,差异有统计学意义(F=19.143,P<0.001).β-半乳糖苷酶染色法结果显示:空白对照组和10、20、40μg/ml碧萝芷组的细胞衰老率分别为(5.35±1.32)% 、(20.08±2.14)% 、(40.55±4.61)% 和(59.26±4.10)%,差异有统计学意义(F=150.150,P<0.001).Transwell小室结果显示:空白对照组及10、20、40μg/ml碧萝芷组的迁移细胞数目分别为(41±5)、(27±2)、(19±1)、(11±2)个,差异有统计学意义(F=59.330,P<0.001);侵袭转移的细胞数目分别为(24±4)、(17±1)、(12±2)、(7±2)个,差异也有统计学意义(F=26.230,P<0.001).Western blot结果显示:碧萝芷可上调P53、P21、P16、P27蛋白表达(F=263.905、424.937、217.515、391.115,P均<0.001),下调E2F1蛋白的表达(F=64.003,P<0.001);同时,各组MCF-7细胞中的MMP-2及MMP-9蛋白表达水平明显降低(F=44.104、45.594,P均<0.001).结论 碧萝芷可能是以促衰老的方式抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长,且能抑制细胞的迁移和转移.
乳腺肿瘤、细胞衰老、迁移、转移、碧萝芷
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R737.9(肿瘤学)
2019-07-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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