二甲双胍单用或联合compound C对小鼠4T1乳腺癌细胞增殖和细胞周期蛋白D1表达的影响

摘要：

目的：研究二甲双胍及单磷酸腺苷活化蛋白激酶（ AMPK）抑制剂（ compound C ）对体外培养的小鼠乳腺癌4T1细胞株增殖抑制及细胞周期蛋白D1（cyclin D1）表达的影响，进一步探索AMPK通路在二甲双胍抗肿瘤的可能作用。方法体外培养小鼠乳腺癌4 T1细胞株至对数生长期，分别以2.5、5、10、20、40 mmol/L二甲双胍及20μmol/L compound C 对其进行单一或10 mmol/L二甲双胍联合20μmol/L compound C干预24、48、72 h。应用CCK-8方法检测不同浓度的二甲双胍、20μmol/L compound C、20μmol/L compound C＋10 mmol/L二甲双胍对该细胞株增殖的抑制情况；Western blot法检测各组细胞内cyclin D1的表达情况。多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用q检验，治疗前后用重复测量数据资料的方差分析。结果 CCK-8法结果显示在体外细胞培养实验中2.5 mmol/L二甲双胍组作用于该细胞株24、48 h后分别和正常对照组比较，细胞存活率差异无统计学意义（24 h： F＝2.87， P＝0.129；48 h：F＝1.63， P＝0.290），作用72 h后，差异有统计学意义（ F＝6.40， P＝0.000）。5、10、20、40 mmol/L二甲双胍组作用于该细胞株24、48、72 h后，该细胞株的增殖被显著抑制（均P＝0.000），且抑制程度随着药物浓度的增大（ F＝332.89、363.54、352.11， P均＝0.000）及作用时间的延长而逐渐增强， compound C单独处理组及10 mmol/L二甲双胍联合20μmol/L compound C处理细胞24、48、72 h后，细胞存活率与正常对照组相比较，差异无统计学意义（ F＝1.08，P＝2.283； F＝1.92， P＝0.050）。 Western blot结果显示随着二甲双胍浓度的增加，各组细胞 cyclin D1表达水平逐渐降低（ F＝54.41、61.69、75.84， P均＝0.000），10 mmol/L二甲双胍联合20μmol/L compound C 作用时，与正常对照组比较， cyclin D1表达水平无明显变化（F＝1.87， P＝0.190）。结论二甲双胍可以抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖；compound C可以拮抗二甲双胍的抑制作用；二甲双胍通过激活小鼠乳腺癌4T1细胞内AMPK，下调cyclin D1蛋白表达。

关键词：二甲双胍、乳腺肿瘤、4 T1细胞、细胞周期蛋白D1

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2014-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：27-33