miRNA-125b-1对乳腺癌SKBR-3细胞放射敏感性的影响

摘要：

目的 探讨miRNA-125b-1对乳腺癌SKBR-3细胞放射敏感性的影响,及其对靶基因HER-2蛋白表达的影响.方法 合成miRNA-125b-1并通过lipofectamineTM2000转染SKBR-3细胞,分别用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot法检测HER-2 mRNA和蛋白质表达水平的变化;流式细胞仪检测细胞周期;四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖抑制率;经不同剂量X线照射后,平板克隆形成实验计算细胞存活率,用单击多靶数学模型进行曲线拟合作图,求曲线参数D0、Dq和N值,比较细胞放射敏感性的变化.RT-PCR和Western blot定量结果的组间比较采用单因素方差分析,细胞周期及细胞增殖实验结果的组间比较采用重复测量方差分析.结果 miRNA-125b-1转染后的SKBR-3细胞中HER-2 mRNA (F=447.78,P=0.00) 和蛋白质水平(F=10.07,P=0.01)显著下降;转染后的SKBR-3细胞出现了G2M期阻滞;miRNA-125b-1组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组(F=163.28,P=0.00);曲线拟合后显示,转染后的细胞(D0=1.87,Dq=2.68,N=4.21)与对照组(D0=2.51,Dq=4.10,N=5.11)相比D0,Dq和N值均下降 (SER=1.34,P<0.05),提示细胞放射敏感性增加.结论 miRNA-125b-1使乳腺癌SKBR-3细胞的放射敏感性增加,可为HER-2阳性的乳腺癌提供新的治疗方法.

关键词：乳腺肿瘤、放射疗法、miRNA-125b-1、微小RNA、人表皮生长因子受体2

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分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：广东省科技计划基金资助项目2008B030301345

在线出版日期：2012-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：703-712