siRNA 沉默hTERT基因表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 应用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)抑制乳腺癌MCF-7细胞hTERT的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖和凋亡的效应.方法 体外化学合成针对hTERT基因的siRNA序列,在脂质体介导下转染MCF-7细胞,实时定量PCR检测hTERT mRNA表达水平,Western blot检测hTERT蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡状况,MTT法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验检测克隆形成率.结果 所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比均可有效抑制hTERT的表达,hTERT siRNA转染MCF-7细胞48 h后,siRNA1～siRNA3组hTERT mRNA表达分别为(35.3±4.2)%、(30.7±2.8)%、(31.3±3.6)%,与阴性对照组(96.4±2.8%)相比,差异有统计学意义.MTT结果显示MCF-7细胞增殖能力显著降低,转染48 h后,siRNA1～siRNA4细胞抑制率分别为(57.6±3.6)%、(61.3±4.3)%、(65.6±6.3)%和(3.1±4.5)%,细胞克隆形成能力下降,凋亡率明显增加.结论 体外化学合成的hTERT siRNA可以有效地抑制MCF-7细胞hTERT的表达,从而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.

关键词：RNA干扰、小干扰RNA、hTERT基因、乳腺癌、MCF-7细胞

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分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：浙江省科技计划项目2006C33018

在线出版日期：2009-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：538-546