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10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2018.02.009

抗Tim-3单抗通过调控单核/巨噬细胞功能减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

引用
目的 观察Tim-3对小鼠肾缺血再灌注损伤(IRI)的影响,并探讨单核/巨噬细胞在此过程中的作用.方法 取72只C57BL/6小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为四组,每组18只.(1)IR+ Tim-3 mAb组(实验组):每只小鼠腹腔注射抗Tim-3 mAb 200 μg,并于1d后建立小鼠肾脏IR模型;(2)IR+ IgG单抗组(阴性对照组):每只小鼠腹腔注射抗IgG mAb 200 μg,并于1d后建立小鼠肾脏IR模型;(3)IR组:仅建立小鼠肾脏IR模型;(4)对照组:不建立小鼠肾脏IR模型.分别于IR后6、24和48 h时,取每组6只小鼠的内眦静脉血,采用酶促动力学法检测血清肌酐水平;然后处死小鼠,收集各组小鼠肾组织标本,观察肾组织病理学改变并评分,采用免疫组织化学法检测肾组织Tim-3、F4/80表达,采用原位末端标记法(TUNEL)进行检测肾组织细胞凋亡,采用流式细胞术检测外周血单核细胞Tim-3蛋白的表达,采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白.结果 IR组肾组织和单核细胞中Tim-3表达较对照组明显增多(P<0.05);而实验组Tim-3表达量较IR组明显下调(P<0.05).对照组小鼠肾组织结构基本正常,其余三组小鼠肾组织损伤明显加重,且血清肌酐水平明显升高(P<0.05),而实验组血清肌酐水平较IR明显下降(P<0.05).对照组小鼠肾组织凋亡指数较低;与对照组相比,其他三组肾组织凋亡指数明显升高(P<0.05),而实验组肾组织凋亡指数较IR组明显下降(P<0.05),凋亡相关蛋白的表达有同样的变化.对照组肾小管间质有少量F4/80+阳性巨噬细胞浸润;其他三组较对照组巨噬细胞表达明显增多,且主要分布于肾小管间质;实验组F4/80+表达较IR组明显减少.并且F4/80+与Tim-3表达部位一致.IR组肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-a)、白细胞介素18(IL-18)、CXCL-1、CXCL-2表达较对照组明显升高(P<0.05),而Tim-3 mAb明显下调了IR引起的上述炎症因子升高.结论 抗Tim-3单抗可以通过调控单核/巨噬细胞减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤.

Tim-3、缺血再灌注、急性肾损伤、炎症

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国家自然科学基金青年科学基金81300582National Natural Science Foundation of China81300582

2018-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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