冻存的亲属活体供肾者的骨髓源性树突状细胞介导受者淋巴细胞反应

摘要：

目的 探讨冻存的供者骨髓源性树突状细胞(DC)介导肾移植受者淋巴细胞反应的可行性.方法 肾移植前取供者骨髓,分离单个核细胞,液氮冻存备用.术后1、3、6、9个月,取冻存的供者骨髓细胞分离CD34+细胞,并培养DC,检测各时期DC活细胞的比率;同时,分别以供者DC和外周血淋巴细胞(PBL)作为刺激细胞,以术前未冻存过的供者骨髓源性DC作为对照,观察健康志愿者以及受者淋巴细胞对冻存不同时间的供者DC和PBL刺激的反应.结果术前每10 ml骨髓中可分离骨髓单个核细胞(BMMC)的数量平均为6.8 × 107个,免疫磁珠分选获得CD34+细胞数为(4.10±0.58)×105个.冻存不同时间的BMMC复苏后,所分离到的CD34+细胞的比率并无明显差异.术后1个月时,BMMC、CD34+细胞存活率均大幅明显下降,以后呈缓慢进行性下降,BMMC的下降幅度大于CD34+细胞.DC的活细胞比率维持在93.2%～94.8%.肾移植术后,各组DC对健康志愿者和受者淋巴细胞的刺激能力均显著强于PBL(P＜0.05);在术后各时间观察点,健康志愿者淋巴细胞对DC刺激的反应波动在12 067±1190至14 238±1220(P＞0.05),受者淋巴细胞对DC刺激的反应波动较大,在9490±1386～15 233±1098.结论 供者骨髓源性DC具有稳定的细胞活力和刺激能力,其作为术后长时间内介导肾移植受者淋巴细胞反应的刺激原,明显优于供者外周淋巴细胞,术前仅需一次性取少量骨髓冻存,术后可随时且多次用于监测.

关键词：肾移植、树突细胞、低温保存、淋巴细胞培养试验、混合

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分类号：R6(外科学)

在线出版日期：2011-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：39-42