转染组织因子胞内段siRNA阻抑人脐静脉内皮细胞凋亡的体外实验

摘要：

目的 探讨转染组织因子胞内段小片段干扰RNA(siRNA)对血管内皮细胞凋亡的影响.方法 体外设计组织因子胞内段siRNA Ⅰ和siRNAⅡ,插入质粒DNA后用脂质体将其转入人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)中.3组HUVEC分别转染siRNAⅠ质粒(siRNAⅠ组)、siRNAⅡ质粒(siRNAⅡ组)和pc DNA~(TM)6.2GW/-miR质粒(对照组).取各组HUVEC细胞,分别与CD8~+ T淋巴细胞进行混合淋巴细胞反应.用流式细胞仪检测混合淋巴细胞反应中HUVEC的凋亡率,用磁珠法检测混合淋巴细胞反应上清液中活化部分凝血活酶时间(APTT).结果 插入的siRNA经过测序,证实为正确序列.HUVEC转染siRNA后24 h及48 h,siRNAⅠ组和siRNAⅡ组HUVEC的凋亡率均低于对照组(P<0.01).siRNA Ⅰ组HUVEC的凋亡率低于siRNAⅡ组(P<0.05).3组上清液的APTT较对照(RPMI 1640培养基)缩短(4±0.46)s(P<0.05).siRNA Ⅰ组和siRNAⅡ组与对照组相比较,APTT的差异无统计学意义(P>0.05).结论 组织因子胞内段siRNA构建成功.转染该siRNA可在不影响凝血功能的情况下对混合淋巴细胞反应中的内皮细胞起到一定保护作用,减少内皮细胞的凋亡.

关键词：凝血致活酶、细胞内、内皮细胞、细胞凋亡、RNA、小分子干扰

所属期刊栏目：31

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家自然科学基金杰出青年科学基金30600570

在线出版日期：2010-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：114-117