10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2007.06.003
血管内皮生长因子促进大鼠的移植胰岛再血管化并提高其存活率
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)对大鼠的移植胰岛再血管化及对其存活率和功能的影响.方法 构建质粒pIRES2-EGFP/VEGF165,以脂质体法在体外转染大鼠(供者)的血管内皮细胞.流式细胞术检测转染效率;免疫组织化学染色检测VEGF的表达.将糖尿病大鼠(受者)随机分为3组,每组10只.对照组:于肾被膜下单纯移植供者的300当量胰岛;实验组和空白转染组除移植供者的300当量胰岛外,分别加入供者的1×106个转染了质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的血管内皮细胞和未经转染的正常血管内皮细胞.移植后监测受者的血糖及血清胰岛素水平.术后第14天,取受者肾脏,行HE染色及Insulin-6、VEGF和CD34免疫组织化学染色.结果 血管内皮细胞中VEGF165的转染效率为13.06%.实验组供者的血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达.实验组受者于移植术后第3天血糖及胰岛素水平恢复正常;对照组和空白转染组虽有所改善,但未恢复到正常水平,与实验组相比,差异有统计学意义.实验组受者肾被膜下可见成团胰岛,Insulin-6免疫组织化学染色呈阳性,周围及内部有大量内皮细胞;VEGF165及CD34免疫组织化学染色呈阳性.对照组和空白转染组肾被膜下的细胞团中心细胞较少,部分被纤维组织代替,内部仅有少量CD34染色阳性的内皮细胞;Insulin-6免疫组织化学染色仅有少量细胞染成棕黄色;VEGF165免疫组织化学染色呈阴性.结论 供者的胰岛与转染了VEGF165的血管内皮细胞共同移植给受者可以促进移植胰岛的再血管化,提高其存活率,并使其功能恢复正常.
基因转移技术、胰岛、移植、内皮细胞
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R3(基础医学)
高等学校博士学科点专项科研项目20050159010
2007-08-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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