异鼠李素对H 2O 2诱导的HaCaT细胞线粒体结构及功能损伤的保护作用研究
目的:探究异鼠李素对氧化应激状态下HaCaT细胞线粒体结构及功能的保护作用。方法:以HaCaT细胞为研究对象,实验分为4组:对照组(常规培养HaCaT细胞)、异鼠李素组(仅加入60 μmol/L异鼠李素处理)、H
2O
2组(仅加入600 μmol/L H
2O
2处理)、异鼠李素+ H
2O
2组(加入60 μmol/L异鼠李素预处理12 h后换液加入600 μmol/L H
2O
2处理12 h)。采用流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,电镜观察线粒体超微结构,共聚焦荧光显微镜观察线粒体膜电位,ATP检测试剂盒检测线粒体ATP含量,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定线粒体DNA拷贝数。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-
t检验。
结果:HaCaT细胞经H
2O
2处理后呈氧化应激状态,H
2O
2组细胞内ROS水平(10 725.0 ± 845.8)显著高于对照组(1 708.0 ± 69.4,
t = 18.40,
P<0.001),线粒体膜电位荧光强度、ATP含量、线粒体DNA特征性基因ND-1表达量均显著低于对照组(
t值分别为4.58、4.48、6.11,
P值分别为0.010、0.010、0.003)。异鼠李素预处理后,异鼠李素+ H
2O
2组ROS水平(7 640.0 ± 922.7)显著低于H
2O
2组(
t = 4.27,
P = 0.013),线粒体膜电位荧光强度、ATP含量、线粒体DNA ND-1基因表达量均显著高于H
2O
2组(
t值分别为4.59、4.58、5.61,
P值分别为0.010、0.010、0.005)。电镜下,异鼠李素+ H
2O
2组线粒体结构较H
2O
2组清晰、完整,线粒体嵴无肿胀或轻度肿胀,未见线粒体空泡化;可见自噬小体吞噬受损的线粒体。
结论:异鼠李素可能通过诱导自噬降低ROS水平,对H
2O
2诱导的HaCaT细胞线粒体结构及功能损伤有保护作用。
白癜风、氧化性应激、线粒体、活性氧、膜电位,线粒体、腺苷三磷酸、异鼠李素、HaCaT细胞
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国家自然科学基金82173406;National Natural Science Foundation of China82173406
2024-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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