葡萄糖转运蛋白3在皮肤鳞状细胞癌中的表达及其对A431细胞增殖、侵袭及迁移的影响
目的:探究葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)在皮肤鳞状细胞癌(cSCC)中的表达及其对cSCC细胞系A431的影响。方法:收集2016年6月至2020年12月经北京大学第三医院皮肤科病理确诊为cSCC患者的石蜡组织标本22份,皮肤科手术中废弃的正常皮肤组织20份作为对照,采用免疫组化法检测cSCC和正常皮肤组织中GLUT3的表达。将A431细胞分为GLUT3过表达组和阴性对照组,分别转染携带SLC2A3基因的慢病毒载体和慢病毒空载体。实时荧光定量PCR及Western印迹法检测各组细胞中GLUT3 mRNA及蛋白的表达水平,MTS法检测各组细胞增殖活力,动态细胞成像分析系统Incucyte S3实时检测各组细胞的迁移和侵袭能力。分别用葡萄糖及乳酸试剂盒检测并比较各组细胞48 h葡萄糖消耗量及乳酸产生量。两组间比较采用两独立样本
t检验,多组间比较采用单因素方差分析。
结果:cSCC组织中GLUT3的表达[免疫组化评分:(9.39 ± 2.56)分]显著高于正常皮肤组织[(2.30 ± 2.60)分],
t = 8.91,
P<0.05。与A431细胞阴性对照组相比,GLUT3过表达组GLUT3 mRNA及蛋白表达水平均明显升高。MTS细胞增殖实验显示,在24和96 h时,GLUT3过表达组A431细胞增殖活力显著高于阴性对照组,
t值分别为2.49、3.54,
P值分别为0.048、0.012;细胞迁移实验在6、12、18、24 h及侵袭实验12、18、24 h时,GLUT3过表达组划痕区域细胞融合率均显著高于阴性对照组(均
P < 0.05)。48 h时,GLUT3过表达组A431细胞的葡萄糖相对消耗量及乳酸相对产生量亦显著高于阴性对照组(
t值分别为2.98、2.20,
P值分别为0.011、0.038)。
结论:GLUT3在cSCC组织中高表达,并可能通过促进细胞对葡萄糖的摄取能力为cSCC细胞提供能量以增强其增殖、迁移和侵袭能力,从而参与cSCC的发生发展。
癌,鳞状细胞、细胞增殖、细胞迁移分析、侵袭、葡萄糖转运蛋白3、A431细胞
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国家自然科学基金81972560;北京市自然科学基金7202231;National Natural Science Foundation of China81972560;Beijing Municipal Natural Science Foundation7202231
2023-07-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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