ROCK1基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖与迁移及相关分子表达的影响

摘要：

目的:研究ROCK1基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和迁移能力及相关分子表达的影响。方法:免疫组化检测人瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中ROCK1蛋白的表达，Western印迹检测人瘢痕疙瘩组织中ROCK1、转化生长因子β1（TGF-β1）和E钙黏附蛋白（E-Cad）的表达。体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞（HKF），分为ROCK1基因过表达对照组（ROCK1 NC组，转染ROCK1基因过表达对照载体）、ROCK1基因过表达组（ROCK1 OE组，转染ROCK1基因过表达载体）、ROCK1基因干扰对照组（sh NC组，转染ROCK1基因干扰对照载体）、ROCK1基因干扰组（shROCK1组，转染ROCK1基因干扰载体）共4组。细胞计数试剂盒8（CCK8）检测ROCK1基因对HKF存活率的影响；Transwell小室检测ROCK1基因对HKF迁移的影响；实时荧光定量PCR、免疫印迹检测ROCK1、TGF-β1和E-Cad基因mRNA和蛋白的表达。结果:免疫组化检测显示，人瘢痕疙瘩组织中ROCK1表达较正常组织显著降低（
t = 6.47，
P = 0.003）；Western印迹检测显示，与正常组织相比，人瘢痕疙瘩组织中ROCK1、E-Cad蛋白表达显著降低（
t值分别为14.02、162.20，均
P < 0.001），TGF-β1蛋白表达显著升高（
t = 76.01，
P < 0.001）。CCK8测定显示，转染24 h后，ROCK1 OE组细胞活性显著低于ROCK1 NC组（
t值分别为3.25、3.78，
P值分别为0.031、0.019），shROCK1组细胞活性显著高于sh NC组（
t值分别为3.12、2.79，
P值分别为0.036、0.049）。ROCK1 OE组迁移细胞数显著低于ROCK1 NC组（
t = 5.17，
P = 0.004），shROCK1组迁移细胞数显著高于sh NC组（
t = 9.28，
P < 0.001）。ROCK1 OE组与ROCK1 NC组相比，ROCK1、E-Cad mRNA和蛋白表达量显著升高（
P < 0.05或< 0.001），TGF-β1 mRNA和蛋白表达量显著降低（均
P < 0.001）；shROCK1组与sh NC组相比，ROCK1、E-Cad mRNA和蛋白表达量显著降低（
P < 0.05或< 0.001），TGF-β1 mRNA和蛋白表达量显著升高（
P = 0.005或< 0.001）。
结论:ROCK1基因能抑制HKF的增殖及迁移，过表达ROCK1基因能下调TGF-β1基因表达，上调E-Cad基因表达。

关键词：瘢痕疙瘩、成纤维细胞、细胞增殖、细胞运动、转化生长因子β、钙黏着糖蛋白类、ROCK1基因

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资助基金：安徽高校省级自然科学研究重点项目KJ2014A108;安徽医科大学校科研基金2019xkj094;Provincial Natural Science Research Key Project of Anhui UniversitiesKJ2014A108;Anhui Medical University Research Fund Project2019xkj094

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：222-228