斑秃患者外周血白细胞介素35的表达及其对调节性T细胞的功能调控

摘要：

目的:观察斑秃患者外周血白细胞介素35（IL-35）表达变化，评估IL-35对斑秃患者调节性T细胞（Treg）活性的调控。方法:收集2019年12月至2021年1月在山西省人民医院就诊的斑秃患者81例（斑秃组）和健康志愿者27例（对照组），分离血清和外周血单个核细胞（PBMC），酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-35水平，实时荧光定量PCR法检测IL-35组成亚基EBI3和IL-12p35 mRNA表达，流式细胞仪检测CD4
+CD25
+CD127
dim/-Treg比例。使用重组人IL-35刺激纯化的Treg，ELISA检测培养上清液中穿孔素和颗粒酶B水平，实时荧光定量PCR检测EBI3、IL-12p35和免疫检查点分子程序性死亡蛋白1、黏蛋白结构域蛋白3、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4、淋巴细胞活化基因3 mRNA表达；将经IL-35刺激或未刺激的Treg与自体PBMC共培养，用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖水平。计量资料两组之间比较采用
t检验，多组之间比较采用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson检验；计数资料比较采用卡方检验。
结果:与对照组比较，斑秃组IL-35水平[（90.10 ± 11.98）ng/L比（100.74 ± 28.71）ng/L，
t= 2.71，
P= 0.008]、PBMC中EBI3 mRNA（1.06 ± 0.15比1.25 ± 0.11，
t= 6.09，
P < 0.001）、IL-12p35 mRNA（1.00 ± 0.15比1.38 ± 0.22，
t= 10.16，
P < 0.001）、Treg比例（5.91% ± 1.17%比6.85% ± 1.23%，
t= 3.54，
P= 0.001）均显著降低。斑秃组Treg比例与血清IL-35水平（
r= 0.25，
P= 0.026）、PBMC中EBI3 mRNA（
r= 0.31，
P= 0.004）、IL-12p35 mRNA水平（
r= 0.24，
P= 0.032）均呈正相关。斑秃组未刺激的Treg分泌穿孔素、颗粒酶B水平以及EBI3、IL-12p35、免疫检查点分子mRNA表达均显著低于对照组Treg（
P < 0.05或0.001），抑制PBMC增殖的能力亦低于对照组（
P= 0.013）。重组人IL-35刺激后斑秃患者Treg分泌穿孔素和颗粒酶B水平与未刺激Treg相比无明显变化（
P > 0.05），但EBI3、IL-12p35、免疫检查点分子mRNA表达均显著升高（
P < 0.05或0.001），抑制PBMC增殖的能力亦增强（
P= 0.037）。
结论:斑秃患者外周血IL-35水平明显降低，与Treg功能减弱密切相关，可能参与斑秃发病。

关键词：斑秃、白细胞介素类、T淋巴细胞，调节性、穿孔素、颗粒酶类、白细胞介素35、免疫检查点

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资助基金：山西省重点研发计划项目201803D31158;Key Research and Development Program of Shanxi Province201803D31158

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：224-230