circIGF2BP3调控光老化皮肤成纤维细胞自噬水平的研究
目的:初步探究circIGF2BP3对光老化皮肤成纤维细胞自噬水平的影响。方法:取中山大学附属第三医院泌尿外科6例儿童包皮环切术后包皮组织,分离培养成纤维细胞,以每日10 J/cm
2长波紫外线(UVA)连续照射14 d,建立UVA诱导的光老化成纤维细胞模型(UVA处理组),未经处理的正常成纤维细胞作为对照组,β半乳糖苷酶染色、Western印迹法检测P21蛋白表达,CCK8法检测细胞活力验证建模是否成功。Western印迹法检测光老化成纤维细胞中自噬相关蛋白P62、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ表达,qRT-PCR验证光老化与正常成纤维细胞间circIGF2BP3表达差异,并对其进行生物学注释。将原代成纤维细胞分为4组:空载组、UVA +空载组,circIGF2BP3过表达组、UVA+ circIGF2BP3过表达组,Western印迹法检测各组细胞中自噬相关蛋白表达水平。两独立样本均数的比较采用
t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-
t检验。
结果:UVA处理组β半乳糖苷酶染色阳性率(61.33% ± 5.78%)、P21蛋白表达(1.25 ± 0.03)均显著高于对照组(6.37% ± 0.32%、1.00 ± 0.05,
t = 9.49、4.26,
P < 0.01、< 0.05),而细胞活力(74.33% ± 3.48%)显著低于对照组(100%,
t = 7.38,
P < 0.01)。UVA处理组P62蛋白表达及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值均显著高于对照组(均
P < 0.05)。光老化成纤维细胞中circIGF2BP3的相对表达量为0.72 ± 0.04,显著低于对照组(1.00 ± 0.03),
t = 5.46,
P < 0.01。circIGF2BP3过表达组P62蛋白表达(0.60 ± 0.01)及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值(0.71 ± 0.01)均显著低于空载组(1.00 ± 0.02、1.00 ± 0.01;
t = 16.25、2.75,
P < 0.01、
P < 0.05);UVA + circIGF2BP3过表达组P62蛋白表达(1.05 ± 0.02)及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值(2.04 ± 0.05)亦均显著低于UVA +空载组(1.31 ± 0.02、2.72 ± 0.14;
t = 10.49、6.47,均
P < 0.01)。
结论:circIGF2BP3可调控UVA诱导的光老化皮肤成纤维细胞自噬水平,为防治光老化提供了新的潜在治疗靶点。
皮肤衰老、细胞衰老、自噬、成纤维细胞、环状RNA、circIGF2BP3
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国家自然科学基金81773340;广东省自然科学基金2021A1515012622;National Natural Science Foundation of China81773340;Natural Science Foundation of Guangdong Province of China2021A1515012622
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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