Klhl24基因起始密码子突变小鼠毛囊异常生理表型分析
目的:探究
Klhl24基因起始密码子突变小鼠毛囊异常的生理表型,为阐明
Klhl24调控毛囊发育的机制提供基础。
方法:将通过CRISPER/Cas9技术构建的
Klhl24基因起始密码子突变
Klhl24
c.3G>T杂合(
Klhl24
c.3G/T)雄性小鼠与野生型雌性小鼠杂交,对同窝小鼠进行基因型鉴定,
Klhl24
c.3G/T
雄性小鼠和野生型(WT)雄性小鼠分别作为实验组与对照组,每组小鼠≥ 3只。在小鼠出生后第21天(第1个毛发静止期)及45天(第2个毛发静止期)进行胶带贴毛实验,对小鼠背部皮肤组织进行Ki67免疫组化检测,并用扫描电镜、透射电镜观察,用脱氧核糖核苷酸介导的dUTP末端标记(TUNEL)试剂盒检测毛囊内凋亡细胞。实验组与对照组检测结果比较采用Dunnett-
t检验。
结果:第1个静止期与第2个静止期
Klhl24
c.3G/T小鼠每0.25 cm
2胶带脱落毛干数量分别为1 224 ± 51.08与1 514 ± 72.15,WT小鼠分别为320 ± 55.68和125 ± 2.86,第1、2个静止期
Klhl24
c.3G/T小鼠脱落毛干数量均明显多于WT小鼠(
t = 11.96、19.24,均
P < 0.001)。对第1个静止期脱落毛干进行扫描电镜观测,显示脱落毛干底部呈杵状。出生后第59天时,WT小鼠背部无新毛干长出,毛囊处于静止期,而
Klhl24
c.3G/T小鼠背部已有新毛干长出,毛囊进入下一个生长期。透射电镜观察显示,在第1个毛囊静止期(P21)
Klhl24
c.3G/T
小鼠背部皮肤毛囊细胞中线粒体内嵴结构混乱,单个毛囊结构中凋亡细胞数量为12 ± 1.15,高于WT小鼠(3 ± 0.63,
n = 8,
t = 6.874,
P < 0.001)。
结论:Klhl24
c.3G/T小鼠毛发异常表型主要为毛囊静止期锚定毛干能力降低,毛囊生长期提前,毛囊细胞中线粒体结构异常,并且凋亡细胞数量增加。
毛囊、小鼠,突变型、秃发、线粒体、细胞凋亡、Klhl24基因
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国家自然科学基金81730084;中国博士后科学基金2017M620543;National Natural Science Foundation of China81730084;China Postdoctoral Science Foundation2017M620543
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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967-973