NCSTN基因沉默对HaCaT细胞增殖分化的影响
目的:检测NCSTN基因稳定沉默的人永生化角质形成细胞（HaCaT）增殖活性及相关分化蛋白的改变，初步探索反常性痤疮发病的可能机制。方法:构建慢病毒介导shRNA沉默NCSTN基因的HaCaT细胞模型（shRNA组），转染空载慢病毒的HaCaT细胞作为阴性对照组，实时定量PCR和Western印迹法检测NCSTN基因的沉默效率。CCK8法检测HaCaT细胞增殖活性，实时定量PCR和Western印迹法检测HaCaT细胞角蛋白（CK1、CK5、CK7、CK10、CK14、CK16、CK17、CK18、CK19、CK20）及其他分化分子（内披蛋白、兜甲蛋白）mRNA和蛋白的表达。两组计量资料的比较采用两独立样本
t检验。
结果:shRNA组NCSTN mRNA及蛋白表达（0.42 ± 0.19、0.30 ± 0.07）均显著低于阴性对照组（1.00 ± 0.34、1.00 ± 0.26；
t = 5.196、2.637，
P < 0.001、< 0.05），基因沉默效率达70%。与阴性对照组相比，shRNA组HaCaT细胞明显增殖活跃，CK16、CK19蛋白表达显著下调（
t = 3.787、3.817，
P < 0.01、< 0.05），终末分化分子内披蛋白表达明显降低（
t = 2.904，
P < 0.05）。
结论:稳定沉默NCSTN基因表达会引起HaCaT细胞异常增殖分化，为后续探究NCSTN基因突变引起反常性痤疮提供新思路。
化脓性汗腺炎、基因沉默、角蛋白细胞、细胞增殖、细胞分化、角蛋白质类、HaCaT细胞、NCSTN基因
53
国家自然科学基金81472872;中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目2016-I2M-1-002;北京协和医学院中央高校基本科研业务费项目3332019160;National Natural Science Foundation of China81472872;CAMS Innovation Fund for Medical Sciences2016-I2M-l-002;Fundamental Research Funds for Central Universities in PUMC3332019160
2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
704-709
