miR-203调控锌指蛋白281表达对黑素瘤细胞增殖、迁移的影响
目的:初步探究微小RNA-203（miR-203）调控锌指蛋白281（ZNF281）对黑素瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:常规培养人血管内皮细胞系ECV304、人黑素瘤细胞系A375、M14、SK-MEL-28、SK-MEL-2，实时荧光定量PCR检测各细胞系中miR-203表达情况，Western免疫印迹法检测各细胞系中ZNF281蛋白水平。A375、M14细胞分别分为5组：对照组（细胞正常培养）、miR-203模拟物对照组（加入miR-203模拟物阴性对照）、miR-203抑制剂对照组（加入miR-203抑制剂阴性对照）、miR-203模拟物组（加入miR-203模拟物）、miR-203抑制剂组（加入miR-203抑制剂）。实时荧光定量PCR检测各组A375、M14细胞中miR-203的表达，CCK8法检测各组A375、M14细胞增殖活性，Transwell实验检测各组A375、M14细胞迁移数量，Western免疫印迹法检测各组A375、M14细胞中ZNF281蛋白的表达。双荧光素酶验证miR-203与ZNF281的靶向关系。多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-
q法。
结果:与血管内皮细胞系ECV304相比，黑素瘤细胞系A375、M14、SK-MEL-28、SK-MEL-2中miR-203表达水平较低（均
P < 0.05），ZNF281蛋白水平较高（均
P < 0.05）。与对照组、miR-203模拟物对照组、miR-203抑制剂对照组相比，miR-203模拟物组A375、M14细胞中miR-203水平均显著升高（
F = 487.632、68.454，均
P < 0.05），细胞迁移数量均显著降低（均
P < 0.05），ZNF281蛋白表达均显著降低（均
P < 0.05）；miR-203抑制剂组A375、M14细胞中miR-203表达均显著降低（均
P < 0.05），细胞迁移数量均显著增加（均
P < 0.05），A375细胞中ZNF281蛋白表达显著升高（均
P < 0.05），36、48、60、72 h A375细胞增殖活性显著升高（均
P < 0.05），24、36、48、60、72 h M14细胞增殖活性均显著升高（均
P < 0.05）。miR-203与ZNF281之间存在靶位点。
结论:上调miR-203表达可抑制黑素瘤细胞增殖、迁移，下调miR-203表达可促进黑素瘤细胞增殖、迁移，可能通过调控ZNF281的表达实现。
黑色素瘤、微RNAs、细胞增殖、细胞迁移分析、锌指蛋白281、微小RNA-203、A375细胞、M14细胞
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河南省医学科技攻关计划项目2018020207;Medical Science and Technology Project of Henan Province2018020207
2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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