Nrf2蛋白在中波紫外线照射HaCaT细胞中的光保护作用
目的 探讨Nrf2对中波紫外线(UVB)致HaCaT细胞光损伤的保护作用及其作用机制.方法 将培养的HaCaT细胞分为对照组、UVB组、Nrf2组、Nrf2+ UVB组,Nrf2组、Nrf2+ UVB细胞感染Nrf2基因过表达慢病毒,UVB组、Nrf2+ UVB组细胞以30 mJ/cm2的UVB照射30 s,继续培养24h,观察UVB照射后HaCaT细胞形态的变化,Western印迹检测各组Nrf2蛋白水平,CCK8法检测各组细胞生存率,流式细胞仪检测各组细胞活性氧(ROS)水平,生化法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平.多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 对照组HaCaT细胞形态为多角形、呈簇集状生长,UVB照射后细胞出现皱缩、变圆,漂浮细胞数增多,贴壁数量明显减少.对照组、UVB组、Nrf2组、Nrf2+ UVB组Nrf2蛋白相对表达水平分别为1.84±0.047、0.63±0.082、2.19±0.168、1.43±0.069,差异有统计学意义(F=64.81,P<0.05),Nrf2组水平高于对照组(t=14.82,P<0.05);4组细胞生存率分别为98.00%±2.39%、24.40%±2.98%、71.63%±3.39%、43.38%±3.39%,差异有统计学意义(F=236.66,P<0.05),UVB组细胞活力低于对照组(t=33.34,P< 0.05)和Nrf2+ UVB组(t=10.07,P<0.05);4组细胞的相对ROS含量分别为1.27±0.10、5.65±0.19、2.10±0.73、3.67±0.19,差异有统计学意义(F=481.39,P<0.05),UVB组高于对照组(t=33.68,P< 0.05)和Nrf2+ UVB组(t=12.47,P<0.05).4组细胞SOD水平差异有统计学意义(F=170.76,P< 0.05),UVB组低于对照组(t=11.25,P<0.05)和Nrf2+ UVB组(t=17.52,P<0.05).4组细胞IL-6水平差异有统计学意义(F=532.34,P<0.05),UVB组高于对照组(t=28.48,P<0.05),Nrf2+UVB组低于UVB组(t=27.82,P<0.05).4组细胞TNF-α水平差异无统计学意义(F=2.02,P=0.19).结论 Nrf2可以通过降低细胞内ROS水平,提高内源性抗氧化酶SOD的活性,保护细胞免受UVB照射引起的氧化损伤.
NF-E2相关因子2、紫外线、活性氧、超氧化物歧化酶、HaCaT细胞、氧化损伤
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国家自然科学基金;National Natural Science Foundation of China
2020-04-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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