他克莫司对人角质形成细胞蛋白酶活化受体2表达及功能的影响
目的 研究他克莫司对体外培养的人角质形成细胞蛋白酶活化受体2(PAR-2)表达及功能的影响.方法 10-9～10-5 mol/L他克莫司与人角质形成细胞共培养24 h后,采用半定量反转录-聚合酶链反应、免疫荧光和Western印迹分别检测人角质形成细胞PAR-2 mRNA和蛋白表达水平的变化,应用Fluo-4钙荧光探针检测不同浓度他克莫司对人角质形成细胞激活PAR-2后引起的细胞内钙离子浓度变化的影响,以不加他克莫司处理组为对照组.采用单因素方差分析比较各组人角质形成细胞PAR-2表达和细胞内钙离子浓度,LSD-t检验进行两两比较.结果 PAR-2在角质形成细胞的胞膜和胞质表达.角质形成细胞与10-9～10-5 mol/L他克莫司共培养24 h后,PAR-2 mRNA的表达水平与对照组比较均显著降低(均P<0.05),且与他克莫司浓度呈负相关(r=-0.962,P=0.009).免疫荧光和Western印迹显示,与对照组比较,10-5和10-6 mol/L他克莫司组PAR-2蛋白表达水平显著降低(均P<0.05),10-7 mol/L他克莫司组PAR-2蛋白表达水平亦降低(免疫荧光法P<0.05;Western印迹法P>0.05),但10-8和10-9 mol/L他克莫司组PAR-2表达水平变化无统计学意义(均P>0.05).共培养24 h后,10-5、10-6和10-7 mol/L他克莫司组PAR-2激活后细胞内钙离子峰浓度(峰值吸光度分别为1463±283、1455±270、1423±291)较对照组(1602±407)显著降低(t值分别为2.582、2.821、2.923,P值分别为0.032、0.022、0.019),10-8和10-9 mol/L他克莫司组(分别为1649±379、1633±415)变化无统计学意义(t值分别为0.846、0.462,P值分别为0.422、0.657).结论 他克莫司可抑制人角质形成细胞PAR-2的表达,并抑制PAR-2激动剂所引起的钙离子动员.
他罗利姆、角蛋白细胞、钙信号、受体、凝血酶、PAR-2
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2019-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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