精胺氧化酶抑制剂SI-4650抑制人恶性黑素瘤A375细胞增殖的分子机制研究

摘要：

目的 探讨精胺氧化酶抑制剂SI-4650对人恶性黑素瘤A375细胞增殖的影响及其机制.方法 取0、10、20、40、80、160μmol/L SI-4650作用A375细胞24、48、72 h,MTT法分析SI-4650对细胞增殖抑制率的影响.根据增殖活性,筛选出浓度分别为0(对照组)、40、80μmol/L的SI-4650处理A375细胞48 h,化学发光法检测细胞内精胺氧化酶活性;高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内多胺含量;流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡;Western印迹分析凋亡标志蛋白Bax、c-PARP,凋亡抑制蛋白Bcl-2和自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达.多组均数比较采用单因素方差分析,组间比较采用SNK-q检验.结果 不同浓度、不同处理时间的SI-4650对A375细胞增殖抑制率差异均有统计学意义(F=977.23、5.16,均P<0.001).对照组、40μmol/L组、80μmol/L组A375细胞精胺氧化酶活性(F=242.58,P<0.001)、精脒和总多胺含量(F=338.02、2931.07,P<0.001)、S期细胞比例(F=31.66,P<0.001)、凋亡细胞比例(F=100.68,P<0.001)、凋亡相关蛋白Bax、c-PARP、Bcl-2水平(F=35.51、730.11、27.54,P<0.001)、自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ水平(F=35.87、425.04,P<0.001)差异均有统计学意义;40μmol/L组、80μmol/L组精胺氧化酶活性(发光强度61432.85±2620.92、43337.35±1221.25)低于对照组,精脒(1.97±0.007、1.88±0.006)和总多胺(3.18±0.03、2.81±0.01)含量低于对照组,S期细胞比例(27.61％±2.05％、31.58％±1.45％)高于对照组,凋亡细胞比例(7.59％±0.63％、20.14％±2.27％)高于对照组,凋亡标志蛋白Bax(0.83±0.12、1.18±0.16)、c-PARP(0.32±0.002、0.79±0.035)和自噬标志蛋白Beclin-1(1.00±0.007、1.14±0.003)、LC3-Ⅱ(0.31±0.001、0.98±0.003)水平高于对照组,凋亡抑制蛋白Bcl-2水平(0.65±0.09、0.12±0.002)低于对照组(均P<0.05).结论 SI-4650能抑制A375细胞增殖,其机制可能与干扰多胺代谢和诱导细胞周期阻滞、细胞凋亡和自噬相关.

关键词：黑色素瘤、精胺、精脒、细胞增殖、细胞凋亡、自噬、细胞系、肿瘤、精胺氧化酶抑制剂

所属期刊栏目：52

资助基金：国家自然科学基金81372265、30772590;肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室开放基金项目2016KZL01、2016KZL04National Natural Science Foundation of China81372265, 30772590;Open Foundation of Hubei Key Laboratory of Tumor Microenvironment and Immunotherapy2016KZL01, 2016KZL04

在线出版日期：2019-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：722-728