泛素结合酶2S在恶性黑素瘤中的表达及其对黑素瘤细胞生物学行为的影响

摘要：

目的 探讨恶性黑素瘤(MM)组织中泛素结合酶2S(UBE2S)的表达及其对黑素瘤细胞生物学行为的影响.方法 应用免疫组化检测UBE2S在128例原发性MM、64例转移性MM、16份非瘤组织(8份瘤旁组织、8份正常表皮组织)芯片中的表达.实时定量PCR检测A375、MUM-2B及MUM-2C黑素瘤细胞株中UBE2S mRNA表达水平.将黑素瘤A375及MUM-2B细胞株分别分为两组,干扰组使用含有UBE2S RNA干扰序列的慢病毒转染,对照组使用含有对照序列的慢病毒转染,72 h后实时定量PCR检测A375和MUM-2B黑素瘤细胞株中UBE2S mRNA表达水平.用试剂盒检测各组细胞caspase3/7活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率及周期分布;应用Transwell法及Western印迹分别检测敲减UBE2S对A375细胞迁移侵袭能力及N-钙黏蛋白表达的影响.使用SPSS 22.0软件进行统计学分析,正态分布数据组间比较采用独立样本t检验,计数资料采用卡方检验,非正态分布数据比较采用Mann-Whitney U检验,通过Spearman系数评估UBE2S表达水平与T分期的相关性.结果 UBE2S在98例(51.0％)MM组织中高表达,16例非瘤组织中均低表达,两组间高表达率差异有统计学意义(x2=11.905,P＜ 0.01);UBE2S表达水平与肿瘤T分期呈负相关(ρ=-0.210,P=0.043).A375、MUM-2B、MUM-2C细胞间UBE2S mRNA相对表达量差异有统计学意义(F=817.228,P＜0.01).Caspase3/7活性在干扰组A375细胞(t=17.572,P＜0.01)与干扰组MUM-2B细胞(t=24.552,P＜0.01)分别较相应对照组明显增加;干扰组A375细胞较对照组G1期细胞比例明显升高(t=7.365,P＜ 0.01),而S期比例明显降低(t=-9.190,P＜0.01),G2/M期无明显变化(t=-0.227,P＞0.05);干扰组MUM-2B细胞G1期(t=12.676,P＜0.01)、G2/M期(t=13.045,P＜ 0.01)细胞比例高于对照组,但S期比例低于对照组(=-15.718,P＜0.01).Transwell实验显示,干扰组较对照组A375细胞迁移(t=-35.727,P＜0.05)及侵袭(t=-125.000,P＜0.01)能力降低.Western印迹检测显示,干扰组较对照组A375细胞N-钙黏蛋白表达下调.结论 UBE2S在黑素瘤组织过表达,其表达水平与肿瘤分期相关;敲减UBE2S对黑素瘤细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移及侵袭能力均有影响,并且可能通过调控N-钙黏蛋白表达促进MM细胞转移.

关键词：痣和黑素瘤、泛素缀合酶类、肿瘤分期、细胞系、肿瘤、N-钙粘蛋白

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资助基金：国家自然科学基金81472887;浙江省省级公益技术应用研究计划项目2016C33206;浙江省医药卫生科技计划项目2014KYB200;义乌市一般科研计划项目17-1-29National Natural Science Foundation of China81472887;Zhejiang Provincial Public Welfare Technology Research and Social Development Project2016C33206;Zhejiang Medical and Health Science and Technology Plan Project2014KYB200;General and Scientific Research Project of Yiwu17-1-29

在线出版日期：2019-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：542-547