咖啡酸衍生物WSY6对黑素细胞氧化应激损伤的保护用及机制研究

摘要：

目的 探讨咖啡酸衍生物WSY6对过氧化氢(H2O2)诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用和潜在分子机制.方法 体外培养原代人表皮黑素细胞,分为对照组(不做任何处理)、H2O2组(1 mmol/LH2O2处理)和6.25、12.5、25 μmol/LWSY6组(分别用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6预处理1h后再用1 mmol/L H2O2处理1h).继续培养24 h后,用MTS法测定黑素细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH释放量.部分黑素细胞分为抑制剂组(用p38抑制剂预处理1h,再用1 mmol/LH2O2处理1h)和H2O2组(直接用1 mmol/LH2O2处理1h),处理完成后继续培养24 h,用试剂盒检测LDH的释放量.部分黑素细胞用25 μmol/L WSY6预处理1、2、4h后,再用H2O2处理1h,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;部分黑素细胞用6.25、12.5、25 μmol/L WSY6处理1h后,再用H2O2处理1h,Western印迹法检测细胞色素C(cyto-c)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9和磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)及c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的表达.结果 与对照组相比,H2O2组黑素细胞存活率明显降低(29.22％±1.31％,P＜0.05),细胞内LDH释放量增加(47.19％±4.85％,P＜0.05),ROS水平明显升高(18.37±1.59,P＜0.05),caspase-3和caspase-9的表达亦均升高.与H2O2组相比,6.25、12.5、25μmol/L WSY6组细胞存活率明显增加(52.48％±1.17％、60.21％±0.25％、78.32％±1.73％,P＜0.05),LDH释放量明显下降(21.99％±0.22％、15.38％±0.45％、13.18％±0.38％,均P＜0.05),25 μmol/L WSY6处理1、2、4h组细胞内ROS显著下降(7.59±1.00、6.22±0.52、5.15±0.48,均P＜0.05).同时p38抑制剂组黑素细胞LDH释放量较H2O2组显著下降(P＜0.05).Western印迹法显示,WSY6预处理后,与H2O2组相比,caspase-3和caspase-9表达明显降低,p-p38表达下降,但p-ERK和p-JNK表达无明显变化;同时WSY6组p38 MAPK下游产物p-p53表达也下降,且WSY6浓度越高,下降越明显.结论 WSY6对H2O2诱导的黑素细胞氧化应激损伤有显著的保护作用,可能通过p38 MAPK途径发挥作用.

关键词：白癜风、黑素细胞、氧化性应激、咖啡酸、乳酸脱氢酶类、细胞外信号调节MAP激酶类

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在线出版日期：2019-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：869-873