京尼平苷通过PI3K-Akt途径拮抗黑素细胞氧化损伤

摘要：

目的 探讨京尼平苷对体外培养的人黑素细胞氧化损伤的拮抗作用,以及PI3K-Akt途径在其中的作用.方法 取健康青少年环切术后包皮,分离并培养表皮黑素细胞.取第2～3代黑素细胞,分为对照组(不做任何处理)、京尼平苷组(125 μmol/L京尼平苷处理)、LY294002组(5μmol/LLY294002处理)、H2O2组(250 μmol/LH2O2处理)、京尼平苷+H2O2组(125 μmol/L京尼平苷处理24 h后,加入250 μmol/L H2O2作用4h)、京尼平苷+LY294002+H2O2组(125 μmol/L京尼平苷处理24 h后,加入5 μmol/L LY294002作用1h,然后用250 μmol/LH2O2作用4h).作用完成后,用噻唑蓝(MTT)法检测黑素细胞增殖活性,Western印迹检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、血红素加氧酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx-1)蛋白的表达,生物化学方法检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量.通过单因素方差分析(ANOVA)对各组间数据进行比较,采用SNK-q检验进行组间两两比较.结果 H2O2组细胞增殖率较对照组明显降低(P＜0.01),p-Akt(P＜ 0.01)、HO-1 (P＜ 0.01)、GPx-1(P＜ 0.05)蛋白表达水平下降,SOD活性、CAT活性降低(均P＜ 0.01),ROS含量显著升高(P＜0.01).与H2O2组相比,京尼平苷+H2O2组黑素细胞增殖率上升(72.98％±8.92％比50.53％±10.85％,P＜ 0.05),p-Akt(P＜ 0.05)、HO-1 (P＜ 0.01)、GPx-1 (P＜ 0.01)蛋白表达上调,SOD[(6.82±1.03) U/mg比(1.29±0.43) U/mg,P＜0.05]和CAT[(46.08±4.16) U/mg比(18.71±3.09) U/mg,P＜0.05]酶活性增高,ROS含量(1 284.33±110.64比2 158±222.75,P＜0.01)减少;京尼平苷+ LY294002+H2O2组黑素细胞增殖率(44.35％±14.85％)较京尼平苷+H2O2组降低(P＜0.05),p-Akt(P＜ 0.01)、HO-1(P＜ 0.05)、GPx-1(P＜ 0.01)蛋白表达下调,SOD活性[(1.31±0.65) U/mg,P＜0.05]和CAT活性[(23.25±5.56) U/mg,P＜0.05]减弱,ROS含量增加(1 668±62.03,P＜ 0.05).结论 京尼平苷可通过PI3K-Akt途径促进黑素细胞HO-1和GPx-1表达,增强SOD和CAT活性,拮抗黑素细胞氧化应激损伤.

关键词：黑素细胞、白癜风、氧化性应激、磷酸肌醇3-激酶类、癌基因蛋白质v-akt、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、京尼平苷

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资助基金：山东省科技发展计划项目2015GSF119006;Shandong Science and Technology Development Project2015GSF119006

在线出版日期：2018-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：797-801