小檗碱抑制人黑素瘤A375细胞增殖的机制研究

摘要：

目的 探讨小檗碱对人黑素瘤A375细胞周期相关miRNA及其靶基因表达的影响.方法 体外培养人黑素瘤A375细胞,经不同浓小檗碱(20、40、60、80 μmol/L)处理48 h后,采用qRT-PCR检测miRNA-582-5p及其靶基因CDK1 mRNA的表达,以及miRNA-188-5p和其靶基因CDK2、Cyclin D1、Cyclin A mRNA的表达.Western印迹检测细胞周期相关蛋白CDK1、CDK2、Cyclin D1和CyclinA的表达.结果 qRT-PCR显示,与空白对照组相比,20、40μmol/L小檗碱组miRNA-582-5p的表达无明显变化(均P＞ 0.05),60、80μmol/L组miRNA-582-5p的表达明显上调(均P＜0.05).与空白对照组相比,各浓度小檗碱组miRNA-188-5p表达均增强(F=22.600,P=0.002),CDK2、CDK1、Cyclin A、Cyclin D1mRNA表达随小檗碱浓度增加逐渐减弱(F=51.976、248.510、626.671、312.740,均P＜ 0.001).Western印迹显示,小檗碱可降低CDK1、CDK2、Cyclin D1、Cyclin A蛋白的表达(F=138.124、110.966、278.772、140.167,均P＜0.001).结论 小檗碱可能通过降低mRNA表达量与升高miRNA-582-5p和miRNA-188-5p含量共同使黑素瘤A375细胞周期相关蛋白CDK1、CDK2、Cyclin D1和Cyclin A表达降低,进而阻滞细胞周期进程,抑制肿瘤生长.

关键词：小檗碱、黑色素瘤、微RNAs、细胞周期蛋白类、细胞周期蛋白依赖激酶类、A375细胞

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资助基金：内蒙古自治区科技计划项目kjt14sf16;内蒙古自治区自然科学基金2016MS08137Science and Technology Planning Project of Inner Mongolia Autonomous Regionkjt14sf16;Natural Science Foundation of Inner Mongolia Autonomous Region of China2016MS08137

在线出版日期：2018-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：456-459