光老化对皮肤成纤维细胞降解晚期糖基化终末产物的影响

摘要：

目的 探讨光老化对皮肤成纤维细胞降解胞内晚期糖基化终末产物(AGE)的影响.方法 连续长波紫外线(UVA)照射诱导成纤维细胞光老化,通过CCK8法、β半乳糖苷酶染色及细胞凋亡率检测验证模型是否构建成功.取原代成纤维细胞分为4组:光老化组(以UVA照射诱导光老化),菲光老化组(不做处理),光老化+ AGE组(以UVA照射诱导光老化后加入200 mg/L AGE-BSA孵育),非光老化+ AGE组(未诱导光老化细胞中加入200 mg/L AGE-BSA孵育),孵育4～72h后,流式细胞仪检测各组细胞内AGE-BSA荧光强度,激光扫描共聚焦显微镜定位、半定量各组细胞8h点胞内AGE-BSA.ELISA检测各组细胞24 h内AGE-BSA浓度变化.结果 与对照组(未照射UVA)相比,UVA照射组细胞增殖活性显著下降(t=7.559,P＜0.05),而凋亡率及β半乳糖苷酶染色阳性率显著升高(t值分别为14.075、43.524,均P＜0.05).流式细胞仪检测示,孵育4、8、16、24、48、72 h后,光老化+ AGE组AGE-BSA平均荧光强度分别为293±8.19、359.67±11.59、347±12.29、338±12.77,334.67±14.22、336.3±10.21,非光老化+AGE组分别为222.33±8.74、276.33±6.11、256.33±5.51、243±10.15,236.33±1.53、240.33±1.52,均分别高于相应时间点光老化组和非光老化组,差异均有统计学意义(P＜0.05).其中光老化+ AGE组AGE-BSA平均荧光强度显著高于相应非光老化+AGE组细胞(P＜0.05).激光扫描共聚焦显微镜观察发现,吞入胞内的AGE-BSA主要位于溶酶体内,光老化+ AGE组AGE-BSA荧光强度显著高于非光老化+AGE组,P＜0.05.ELISA检测发现,32 h点非光老化+ AGE组细胞AGE浓度较8h点下降(14.6±1.2)％,显著高于光老化+AGE组(t=6.604,P＜0.05).结论 光老化皮肤成纤维细胞对吞入胞内AGE-BSA的降解能力下降,可能致AGE在光老化皮肤堆积.

关键词：成纤维细胞、皮肤衰老、细胞衰老、糖基化

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资助基金：广东省自然科学基金2016A030313236;广东省科技计划项目2012B031800057Natural Science Foundation of Guangdong Province of China2016A030313236;Science and Technology Planning Project of Guangdong Province of China2012B031800057

在线出版日期：2018-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：260-264