普萘洛尔对体外培养血管瘤内皮细胞的影响及其分子机制

摘要：

目的 研究普萘洛尔对体外培养的血管瘤内皮细胞(HemEC)增殖及凋亡的影响,探讨其分子机制.方法 收集7例增生期血管瘤患儿的手术切除血管瘤组织用于体外培养HemEC,同时培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照.采用0、25、50、75、100、125、150 μmol/L普萘洛尔分别处理两种细胞24、48、72 h.MTT法检测各组细胞的存活率,流式细胞仪检测凋亡率.采用含或不含100 μmol/L普萘洛尔的培养基分别培养HemEC(分别为普萘洛尔干预组及空白对照组)18h,提取两组细胞总RNA,采用表达谱基因芯片技术检测两组HemEC中差异表达的基因,并通过实时定量PCR验证.结果 25 μmol/L普萘洛尔作用24、48 h可引起HemEC轻微增殖(P＜0.05),而≥100 μmol/L普萘洛尔作用≥24 h可引起HemEC存活率下降,作用≥48 h可引起HUVEC存活率下降.100 ～150 μmol/L普萘洛尔作用24～72 h,HemEC细胞存活率比HUVEC低(P＜0.05).100 ～ 150 μmol/L普萘洛尔作用下,HemEC凋亡率随普萘洛尔作用时间及浓度逐渐升高(均P＜0.05).普萘洛尔干预HemEC后,表达谱基因芯片技术筛选出186个表达差异倍数≥1.5的基因,其中表达明显上调的基因128个,明显下调的58个.实时定量PCR显示,普萘洛尔干预组前蛋白转化酶枯草溶菌素9 mRNA表达水平为空白对照组的(9.88士2.19)倍,脂肪酸结合蛋白3 mRNA为(21.90±8.18)倍,差异均有统计学意义(t=7.028、4.427,P＜0.05).结论 高浓度普萘洛尔对HemEC及HUVEC的增殖均有抑制作用,且对HemEC的抑制作用更强.普萘洛尔抑制HemEC的增长可能与抑制HemEC增殖及促进其凋亡有关.

关键词：血管瘤、普萘洛尔、细胞增殖、细胞凋亡、基因表达谱、寡核苷酸序列分析

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分类号：R36;S1

资助基金：湖南省应用基础研究科技专项计划项目2010FJ6001;湖南省自然科学基金11JJ5054 Science and Technology Planning Program for Applied Basic Research of Hunan Province of China2010FJ6001;Natural Science Foundation of Hunan Province of China11JJ5054

在线出版日期：2017-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：800-805