依维莫司与顺铂协同损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞机制的初步研究

摘要：

目的 探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制.方法 依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组.依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司、25 μmol/L顺铂、50 nmol/L依维莫司+ 25 μmol/L顺铂处理细胞组4组.通过Western印迹进行mTOR、Akt、DNA损伤相关信号以及Chk通路分析.结果 50、100、200 nmol/L依维莫司处理COLO-16细胞12、24 h后,mTOR 2448位点和2481位点的磷酸化水平降低,Rictor 1135位点磷酸化水平也降低.然而,下游信号ULK1蛋白的ser757位点的磷酸化水平、P70 S6激酶的thr389位点的磷酸化水平以及PKCα的thr638/641位点磷酸化水平的变化并不显著.依维莫司处理对Akt的总蛋白水平和磷酸化水平无明显影响.顺铂处理COLO-16细胞12、24 h后,Rictor的thr1135位点磷酸化水平和Chk1的ser345位点磷酸化水平明显升高,但依维莫司单独处理无类似效应.当依维莫司与顺铂联合处理后12和24 h,相对于顺铂单独处理的细胞,上调的Chk1和Rictor磷酸化水平受到明显抑制.结论 COLO-16细胞mTOR信号对依维莫司处理敏感,但其下游信号并非同步产生级联反应.依维莫司可能通过抑制检测点激酶1的激活增强顺铂诱导COLO-16细胞死亡,但无加重顺铂所导致的DNA损伤.

关键词：顺铂、细胞凋亡、COLO-16细胞、依维莫司、检测点激酶1

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分类号：R73;R69

资助基金：国家自然科学基金81371755、81673083、81773342;教育部博士点基金20131106120046;江苏省临床医学科技专项BL2012003;重大疾病创新研究2016ZX320014;医学创新工程2016-12M-1-005National Natural Science Foundation of China81371755,81673083,81773342;Doctoral Fund of Ministry of Education of China20131106120046;Jiangsu Provincial Special Program of Medical ScienceBL2012003;Innovation Research on Critical Diseases2016ZX320014;CAMS Initiative for Innovative Medicine2016-12M-1-005

在线出版日期：2017-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：738-741