胎鼠皮肤无瘢痕愈合培养液优化及皮肤细胞增殖活跃区研究

摘要：

目的 优化昆明远交系(KM)胎鼠皮肤无瘢痕愈合模型的培养液,定位并分析皮肤创伤愈合中细胞增殖活跃区.方法 取60只胎龄15d小鼠背部皮片180块,用无菌微创器在皮片上统一造创,随机等分到6组培养液中培养3d,包括高糖改良Eagle培养基(DMEM)组、DMEM+ 5％胎牛血清(FBS)组、DMEM+ 10％ FBS组、低糖Eagle培养基(MEM)组、MEM+ 5％ FBS组、MEM+ 10％ FBS组.HE染色后观察各组皮肤创口愈合情况,筛选最适培养条件.在最适培养条件下采用EdU细胞标记物定位皮肤创口愈合处细胞增殖活跃区,并用免疫荧光检测其中AP-1蛋白表达.结果 胎鼠微创皮片培养3d后,DMEM组、DMEM+ 5％ FBS组、DMEM+ 10％ FBS组、MEM组、MEM+ 5％ FBS组、MEM+ 10％ FBS组皮片愈合率分别为0、3.33％、6.67％、3.33％、46.67％、26.67％,6组皮片愈合率差异有统计学意义(x2=41.39,P＜ 0.05).两两比较显示,MEM+ 5％ FBS组皮片愈合率显著高于除MEM+10％ FBS组外的其他4组(均P＜0.01).logistic回归分析显示,MEM(OR=11.717,95％ CI 3.274～41.934,P＜0.001)及FBS浓度(5％ FBS:OR=24.625,95％CI3.027 ～ 200.299,P=0.003;10％ FBS:OR=13.449,95％ CI 1.618～111.813,P=0.016)均是促进胎鼠微创皮片愈合的因素.在MEM+ 5％FBS培养条件下,真皮和表皮愈合形态最好,且创面处表皮无增厚现象.EdU细胞增殖标记分析显示,胎鼠皮肤的真皮乳头层和表皮基底层是创面愈合过程中两个主要的细胞增殖活跃区,同时AP-1蛋白在这两个细胞增殖活跃区也有大量表达.结论 MEM+ 5％ FBS为体外培养胎鼠皮肤创伤愈合的最适培养液.胎鼠皮肤的真皮乳头层和表皮基底层是皮肤创伤愈合中两个主要的细胞增殖活跃区,在创面愈合过程中起到重要作用.

关键词：伤口愈合、瘢痕、转录因子AP-1、无瘢痕愈合、胎鼠

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资助基金：国家自然科学基金31560685;塔里木大学研究生科研创新项目TDGRI201521National Natural Science Foundation of China31560685;Master Creation Project of Tarim UniversityTDGRI201521

在线出版日期：2017-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：99-104