miRNA211在人皮肤黑素瘤的表达及功能研究

摘要：

目的 探讨miRNA211 (miR-211)在恶性黑素瘤进展过程中的表达以及靶分子MMP-16与miR-211表达的相关关系.方法 实验分阴性对照组、空载体对照组、miR-211过表达组.TaqMan荧光定量PCR检测miR-211在黑素细胞、黑素瘤细胞的表达,以及在痣、黑素瘤组织中的表达.SRB试验和流式细胞仪分别检测细胞增殖和细胞周期分布.甲基纤维素克隆形成试验和Transwell迁移试验研究细胞克隆形成和细胞迁移.用集落大小衡量克隆形成力,而同一迁移距离下的相对细胞数用来衡量细胞迁移能力.TaqMan荧光定量PCR检测比较miR-211表达增加前后MMP-16 mRNA表达的变化.结果 miR-211在黑素瘤细胞G361、C32和A375表达量分别是0.09±0.02,0.000 52±0.000 20,0.000 03±0.000 01(F=10410,P＜ 0.01).miR-211在黑素瘤标本的表达量(0.17±0.03)显著低于痣的表达量(0.87±0.08),t=9.118,P＜ 0.01.在体外,miR-211表达上调的黑素瘤细胞miR-211过表达组与阴性对照组及空载体对照组比较,细胞增殖与细胞周期分布,差异无统计学意义.miR-211过表达组、空载体对照组的克隆形成力分别是0.49±0.05、0.85±0.09,两组比较,差异有统计学意义(t=2.19,P＜0.05).miR-211过表达组、空载体对照组的克隆形成力分别是0.49±0.06、0.82±0.09,两组比较,差异有统计学意义(t=3.15,P＜ 0.05).而空载体对照组与阴性对照组比较,差异无统计学意义.转染miR-211 mimics后24 h,在miR-211过表达组和空载体对照组的MMP-16 mRNA水平比较分别是0.33±0.02和0.91±0.03,两组比较,t=11.30,P＜ 0.01;48 h分别是0.52±0.01和0.96±0.02,两组比较,t=5.02,P＜ 0.05;72 h分别是0.71±0.01和0.97±0.03,两组比较,t=3.85,P＜ 0.05.空载体对照组与阴性对照组在3个时间点的比较,差异均无统计学意义.结论 miR-211在恶性黑素瘤的细胞水平和组织水平低表达.miR-211抑制黑素瘤细胞的锚着非依赖性生长及细胞的迁移.miR-211表达上调后,MMP-16 mRNA表达下调,可能是miR-211下游的靶分子从而影响黑素瘤的侵袭转移.

关键词：黑色素瘤、微小RNAs、肿瘤转移、基质金属蛋白酶16、miRNA211

所属期刊栏目：49

分类号：R739.5;S852.65;R392.12

在线出版日期：2016-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：630-635