熊果酸对干扰素γ刺激HaCaT细胞产生白细胞介素33的影响

摘要：

目的：探讨熊果酸对干扰素γ（IFN?γ）刺激HaCaT细胞产生白细胞介素33（IL?33）的影响及其机制。方法不同浓度熊果酸（0、0.1、1、5、10、20、40、80μmol/L）分别刺激HaCaT细胞24、48、72 h，MTT法检测其对细胞增殖的影响。将HaCaT细胞与200μg/L IFN?γ共培养建成炎性细胞模型，再与10和15μmol/L熊果酸共培养，以IFN?γ诱导的HaCaT炎性细胞模型为对照，探讨熊果酸的抗炎作用，RT?PCR法检测IL?6和IL?33 mRNA的表达，Western印迹法检测IL?33、p?ERK1/2和ERK1/2蛋白的表达。结果 MTT法检测显示，5~20μmol/L熊果酸作用24 h对细胞活力影响不大，而40~80μmol/L熊果酸在各个时间点均可明显抑制HaCaT细胞增殖（P<0.05），故后续实验采用10和15μmol/L浓度。HaCaT细胞经IFN?γ刺激后，IL?33 mRNA（0.812±0.036）、IL?6 mRNA（0.947±0.091）表达量和IL?33蛋白表达（1.317±0.119）均显著高于空白对照组（分别为0.412±0.021、0.595±0.030和0.147±0.036，均P<0.05）；而IFN?γ+10μmol/L熊果酸组（分别为0.447±0.042、0.437±0.099和0.923±0.058）和IFN?γ+15μmol/L熊果酸组（分别为0.438±0.028、0.350±0.075和0.564±0.113）又较IFN?γ组（分别为0.812±0.036、0.947±0.091和1.317±0.119）显著降低（均P<0.05），且这两个熊果酸组IL?33 mRNA水平与空白对照组相比差异无统计学意义（P>0.05），而IFN?γ+15μmol/L熊果酸组IL?33蛋白水平显著低于IFN?γ+10μmol/L熊果酸组（P<0.05）。HaCaT细胞分别经IFN?γ刺激5、60 min后，p?ERK1/2蛋白表达均明显高于空白对照组。IFN?γ+15μmol/L熊果酸5 min组和60 min组p?ERK1/2蛋白的相对表达量（0.458±0.053、0.302±0.054）分别低于IFN?γ5 min组（0.941±0.042）和60 min组（0.509±0.032），差异均有统计学意义（P<0.05），而总ERK1/2蛋白表达量不变。结论熊果酸能够降低IFN?γ刺激的HaCaT细胞IL?33的表达量，其机制可能与调节ERK信号通路相关蛋白的表达有关。

关键词：熊果酸、干扰素γ、白细胞介素1、白细胞介素6、细胞外信号调节MAP激酶类、HaCaT细胞、白细胞介素33

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分类号：R73;R5

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在线出版日期：2016-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：495-500