系统性红斑狼疮患者骨髓间充质干细胞的生物学特征及其p27kip1/PTEN蛋白表达

摘要：

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSC)的生物学行为,证实SLE患者BMSC是衰老的干细胞,并探讨其衰老的可能机制.方法 用密度梯度离心和贴壁分离法对6例SLE患者和8例健康人BMSC进行分离培养.光学显微镜观察BMSC形态学改变及生长状况并绘制生长曲线,诱导成骨、成脂分化检测BMSC分化能力,流式细胞仪鉴定BMSC表面标志物及分析细胞凋亡和细胞周期,划痕试验检测BMSC迁移能力,免疫荧光法及蛋白印迹法分析BMSC内p27kip1/PTEN的分布及表达.结果 SLE患者组BMSC形态宽大、扁平、呈多角形,与健康对照组相比,其生长速率、迁移及成骨成脂分化能力均明显降低.SLE组处于早期(Q2)、中晚期(Q4)凋亡的BMSC细胞比例(17.98％±3.26％,16.80％±9.63％)显著高于健康对照组(8.23％±3.25％,3.33％±2.21％),差异有统计学意义(tQ2=3.91,PQ2=0.011;tQ4=2.99,PQ4=0.048).SLE组BMSC阻滞于G0/G1期的细胞百分比显著高于健康对照组(92.34％±5.80％比78.65％±3.22％,t=3.635,P=0.015),同时其S期所占细胞百分比明显低于健康对照组(0.86％±1.72％比5.06％±1.874％;t=3.084,P=0.027).SLE患者BMSC经内参均一化后的p27、PTEN蛋白表达水平(即p27/β肌动蛋白,PTEN/β肌动蛋白)均高于健康对照者,差异有统计学意义(tp27=2.784,PP27=0.039;tPTEN=4.812,PPTEN=0.041).结论 SLE患者BMSCs表现出衰老特征,可能与细胞内p27kip1/PTEN表达水平升高有关.

关键词：红斑狼疮,系统性、间质干细胞、衰老、细胞凋亡、p27kip1/PTEN

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资助基金：广东省自然科学基金2014A030313317Natural Science Foundation of Guangdong Province of China 2014A030313317

在线出版日期：2016-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：396-401