iTRAQ技术筛选人黑素瘤A375细胞系let-7a靶标蛋白

摘要：

目的 同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术在人黑素瘤A375细胞系中筛选let-7a潜在的靶标蛋白,探讨let-7a的抑癌机制.方法 100 nmol/L let-7a模拟物及其对照转染A375细胞,提取细胞总蛋白,运用同位素标记的iTRAQ技术分析和鉴定差异表达的蛋白质,运用生物信息学分析let-7a靶标蛋白及其功能,采用双荧光素酶报告系统验证靶标.结果 let-7a模拟物组和对照组相比,质谱共分析鉴定到327个显著差异蛋白,其中表达量上调＞1.2倍的蛋白有151种,下调＜0.8倍的蛋白有176种.下调的176种蛋白中,软件预测到结合靶标有47个,双荧光素酶报告系统验证表明,let-Ta模拟物组与对照组相比,HMGA2和THOC2野生型3'UTR比值分别降低64.3％和46.4％.结论 iTRAQ技术和生物信息学方法在人黑素瘤A375细胞系中筛选出47个let-7a候选靶标蛋白,其中HMGA2和THOC2分别为let-7a的靶标.

关键词：黑色素瘤、细胞系、肿瘤、微RNAs、蛋白质组学、iTRAQ

所属期刊栏目：49

分类号：R730.43;R318;S856.5

在线出版日期：2016-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：342-347