10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2016.04.007
特应性皮炎患者外周血 T 淋巴细胞Rho 激酶活性变化及其意义
目的:观察特应性皮炎(AD)患者外周血 T 淋巴细胞中 Rho 激酶活化情况,分析其临床意义。方法收集60例 AD 患者和60例健康儿童外周肝素抗凝血8 ml,分离提取 T 细胞和血清。分别用 AD 血清和健康对照血清培养 AD 患者 T 细胞或健康对照 T 细胞,分为患者 T 细胞+自身血清组、患者 T 细胞+健康对照血清组、健康对照 T 细胞+自身血清组、健康对照 T 细胞+ AD 血清组。此外,分别用 Rho 激酶特异性抑制剂Y27632(Y27632组)、CD3/CD28单抗(CD3/CD28单抗组)、Y27632+ CD3/CD28单抗(Y27632+ CD3/CD28单抗组)处理 AD 患者 T 细胞,自身血清培养 AD 患者 T 细胞为患者 T 细胞组。采用 Western 印迹法检测各组 Rho 激酶活性,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测 T 细胞增殖活性,ELISA 检测白细胞介素(IL)6、IL-10水平。结果新鲜分离的 AD 患者外周血 T 细胞 Rho 激酶活性(2.47%±0.89%)显著高于健康对照组(0.65%±0.35%,t =2.729, P <0.05)。AD 患者 T 细胞在体外经10%胎牛血清培养24 h 后 Rho 激酶活性(0.70%±0.38%)较培养前显著降低(t =2.658,P <0.05),但与培养24 h 后健康对照 T 细胞(0.63%±0.32%)相比,差异无统计学意义(t =1.010, P >0.05)。与健康对照血清培养 T 细胞相比,AD 血清培养 T 细胞会增加 Rho 激酶活性(F =8.22,P <0.001),患者 T 细胞+自身血清培养24 h 后 Rho 激酶活性(2.41%±0.87%)明显高于患者 T 细胞+健康对照血清组(0.76%±0.41%),健康对照 T 细胞+ AD 血清组(2.17%±0.85%)显著高于健康对照 T 细胞+自身血清组(0.64%±0.33%),差异均有统计学意义(P <0.05)。Y27632可显著抑制 AD 患者 T 细胞的增殖和 IL-6的分泌(F =18.68、22.95,P <0.001),Y27632组 T 细胞增殖率、IL-6的表达均显著低于患者 T 细胞组(均 P <0.05),且Y27632+ CD3/CD28单抗组也显著低于 CD3/CD28单抗组(均 P <0.05),而 Y27632对 AD 患者 T 细胞 IL-10分泌无显著影响。结论 AD 患者 T 淋巴细胞存在 Rho 激酶信号活化异常,提示 Rho 激酶信号异常在 AD 发病过程中可能发挥着一定的作用。
皮炎、特应性、T 淋巴细胞、rho 相关激酶类、信号传导、白细胞介素 6、白细胞介素 10
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R28;R98
2016-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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