西达本胺联合姜黄素对人皮肤T细胞淋巴瘤细胞系Hut78的影响及其分子机制

摘要：

目的 研究西达本胺联合姜黄素对皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,探讨西达本胺联合姜黄素治疗CTCL的机制.方法 分别用0.3、0.6、1.2、2.4 μmol/L西达本胺,10 μmol/L姜黄素,1.2 μmol/L西达本胺联合10 μmol/L姜黄素处理Hut78细胞24、48、72 h后,采用MTS法检测Hut78细胞的生存率.用0.6、1.2 μmol/L西达本胺,10μmol/L姜黄素,1.2μmol/L西达本胺联合10 μmol/L姜黄素分别处理Hut78细胞24 h,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期,用实时PCR和Western印迹法检测凋亡相关基因Fas、caspase 8、NF-κB p65及细胞周期相关基因P21、CDK2、细胞周期蛋白E(cyclin E)mRNA和蛋白的表达.统计分析采用重复测量方差分析、单因素方差分析和LSD-t检验.结果 西达本胺能明显抑制Hut78细胞的增殖,且呈剂量依赖性(F=266.558,P＜ 0.001)和时间依赖性(F=564.966,P＜ 0.001).培养48 h和72 h时,1.2 μmol/L西达本胺联合10 μmol/L姜黄素对细胞增殖的抑制作用显著强于1.2 μmol/L西达本胺及10 μmol/L姜黄素(均P＜ 0.001).流式细胞仪结果显示,联合组的凋亡细胞比例均显著高于0.6、1.2 μmol/L西达本胺组和10 μmol/L姜黄素组(均P＜0.001).此外,联合组和1.2 μμmol/L西达本胺组G0/G1期细胞比例明显高于0.6μμmol/L西达本胺组和10 μmol/L姜黄素组,而其S期细胞比例及G2/M期细胞比例均明显低于0.6 μmol/L西达本胺组和10 μmol/L姜黄素组(均P＜0.05),联合组与1.2 μmol/L西达本胺组各细胞周期比例差异均无统计学意义(均P＞ 0.05).实时PCR结果显示,联合组和1.2 μmol/L西达本胺组Fas、caspase 8、P21 mRNA的表达均明显高于0.6 μmol/L西达本胺组和10 μmol/L姜黄素组(均P＜0.001),而其NF-κB p65、CDK2、cyclin EmRNA的表达均明显低于0.6 μmol/L西达本胺组和10 μmol/L姜黄素组(均P＜ 0.001).联合组Fas mRNA的表达明显高于1.2 μmol/L西达本胺组(P＜ 0.001),而caspase 8、P21、NF-κB p65 、CDK2、cyclin E mRNA的表达与1.2 μmol/L西达本胺组差异无统计学意义(均P＞0.05).Western印迹结果显示,联合组与0.6、1.2 μmol/L西达本胺、不加药物的对照组比较,Fas、caspase 8、P21蛋白的表达明显增加,而NF-κB p65、CDK2、CyclinE蛋白的表达明显降低,与以上基因mRNA的表达一致.结论 西达本胺通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡来抑制CTCL细胞系Hut78生长,联合姜黄素能明显提高抑制CTCL细胞系Hut78的生长率.

关键词：淋巴瘤,T细胞,皮肤、姜黄素、细胞增殖、细胞凋亡、西达本胺、Hut78细胞

所属期刊栏目：49

资助基金：国家自然科学基金81372915、81402259;北京市科技计划项目Z131107002213028;北京大学第三医院临床重点项目BYSY201209National Natural Science Foundation of China81372915,81402259;Beijing Science and Technology Planning ProjectZ131107002213028;Key Clinical Program of Peking University Third HospitalBYSY201209

在线出版日期：2016-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：112-118