梅毒螺旋体膜蛋白Tpp47通过RhoA/ROCK信号通路调控血管内皮细胞通透性

摘要：

目的 探讨梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47对血管内皮细胞通透性影响的调控机制.方法 用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)构建细胞单层模型,重组蛋白Tpp47(rTpp47)直接与HUVEC单层模型混合培养,或RhoA/ROCK信号通路特异性抑制剂Y-27632预处理后再用rTpp47刺激HUVEC单层模型,以煮沸灭活的rTpp47处理HUVEC单层模型为阴性对照组,采用ELISA检测各组培养1、4h时辣根过氧化物酶(HRP)流量,培养12h用荧光染料罗丹明-鬼笔环肽染色细胞骨架系统,共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F肌动蛋白排列变化.用Western印迹检测rTpp47与煮沸灭活的rTpp47分别处理HUVEC单层模型后细胞RhoA的表达水平.结果 rTpp47刺激HUVEC单层模型1h时HRP流量(0.81±0.10)高于阴性对照组(0.39±0.09),差异有统计学意义(P＜0.05),而此时Y-27632预处理组HRP流量(0.51±0.10)与单用rTpp47刺激组及阴性对照组 相比,差异无统计学意义(均P＞ 0.05).培养4h时,单用rTpp47刺激组HRP流量显著增加(2.31±0.14),且高于Y-27632预处理组(1.21±0.12)及阴性对照组(0.73±0.12),差异有统计学意义(均P＜0.05),而Y-27632预处理组与阴性对照组之间差异无统计学意义.rTpp47刺激HUVEC后,与煮沸灭活的rTpp47作用HUVEC相比,细胞中RhoA表达增加.同时,rTpp47刺激细胞中骨架蛋白F肌动蛋白重排,在胞质中形成应力纤维,抑制剂Y-27632可部分抑制F肌动蛋白重排.结论 梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp47可通过RhoA/ROCK信号转导通路调控血管内皮细胞通透性.

关键词：苍白密螺旋体、内皮、血管、通透性、脐静脉、肌动蛋白、Tpp47、RhoA/ROCK信号通路

所属期刊栏目：49

分类号：R746.4;R3;R285.5

在线出版日期：2016-02-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25