绿原酸抗人皮肤成纤维细胞衰老的研究

摘要：

目的：探讨绿原酸在乙二醛诱导的人皮肤成纤维细胞衰老中的保护作用。方法使用1 mmol/L乙二醛处理体外培养的人皮肤成纤维细胞，构建细胞衰老模型。用5、10、20、40、80μmol/L 绿原酸和乙二醛共同处理人皮肤成纤维细胞，MTT 法检测细胞增殖活性，筛选出绿原酸的有效浓度。1 mmol/L 乙二醛分别与有效浓度的绿原酸（10、20、40μmol/L）共同作用于成纤维细胞，细胞衰老β半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色法及实时荧光定量 PCR 法检测衰老细胞比例和衰老基因 p16INK4a mRNA 的表达情况。统计分析采用单因素方差分析和 LSD法。结果与空白对照组人皮肤成纤维细胞增殖（100％±6.90％）相比，乙二醛可明显抑制细胞增殖（55.65％±2.00％），两组差异有统计学意义（P ＜0.01）。与乙二醛组细胞增殖相比，除乙二醛+5μmol/L 绿原酸组（55.36％±2.58％）外，乙二醛+10、20、40、80μmol/L 绿原酸组对细胞增殖均有不同程度地保护作用（细胞增殖率分别为60.75％±1.32％、67.65％±1.90％、75.71％±3.25％、75.69％±2.38％），呈剂量依赖性，40μmol/L 绿原酸达高峰，80μmol/L 绿原酸与40μmol/L 组相比，细胞活力的差异无统计学意义（P >0.05），因此筛选出绿原酸的有效浓度为10~40μmol/L。与空白对照组衰老细胞比例（13.00％±2.22％）比较，加入乙二醛后，衰老细胞明显增多（35.65％±2.24％），差异有统计学意义（P ＜0.01）。与乙二醛组细胞 SA-β-gal 染色阳性率相比，分别加入10、20、40μmol/L 绿原酸与乙二醛共培养后，细胞 SA-β-gal 染色阳性率呈剂量依赖性减少（31.50％±2.13％、22.31％±3.11％、19.32％±3.01％），差异均有统计学意义（P ＜0.05）。与空白对照组衰老基因 p16INK4a mRNA的表达比较，乙二醛组明显增高（2-ΔΔCt：1.00±0.06比0.26±0.05，P ＜0.01），分别加入10、20、40μmol/L 绿原酸与乙二醛共培养后表达下降（0.88±0.08、0.73±0.06、0.68±0.04，P ＜0.05）。结论绿原酸在乙二醛致人皮肤成纤维细胞衰老中具有潜在的保护作用。

关键词：皮肤衰老、成纤维细胞、乙二醛、绿原酸、细胞衰老、细胞增殖、p16INK4a mRNA

分类号：R73;R68

在线出版日期：2016-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：849-852