宽谱中波紫外线对人表皮黑素细胞非经典Wnt通路的作用研究

摘要：

目的 探讨宽谱中波紫外线(BB-UVB)照射对黑素细胞增殖率、酪氨酸酶活性、黑素含量的影响.方法 分别用0、10、20、30、40、50、100、200、300 mJ/cm2 BB-UVB照射原代培养的黑素细胞,采用CCK8法测定黑素细胞增殖率、多巴比色法测定酪氨酸酶活性、NaOH溶解法测定黑素含量.分别用0、30、50、100 mJ/cm2BB-UVB照射黑素细胞,实时荧光定量PCR检测非经典Wnt通路相关基因mRNA的表达.100 mJ/cm2 BB-UVB照射黑素细胞,用Western印迹检测作用前后非经典Wnt通路相关基因蛋白的表达.多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用独立样本t检验.结果 与对照组相比,10 ～ 300 mJ/cm2 BB-UVB照射后,细胞增殖率均逐渐降低,BB-UVB剂量＞100 mJ/cm2时细胞存活率＜50％,同时,10～100 mJ/cm2 BB-UVB照射后酪氨酸酶活性逐渐增加,100 mJ/cm2 BB-UVB组黑素含量明显增加,差异有统计学意义(均P＜ 0.05).30、50、100 mJ/cm2BB-UVB照射后,WIF-1 mRNA的表达均较对照组逐渐减少,JNK、MITF、RAC1、TYR的表达均较对照组逐渐升高,而30、50 mJ/cm2 BB-UVB组WNT5A mRNA表达量均较对照组降低,100 mJ/cm2 BB-UVB组WNT5A mRNA表达量则明显升高(P＜0.05).100 mJ/cm2 BB-UVB照射后,WIF-1蛋白的表达量较对照组降低,WNT5A、JNK、MITF、RAC1、TYR蛋白表达较对照组升高(P＜0.05).结论 紫外线照射降低黑素细胞增殖率,提高黑素细胞酪氨酸酶活性和黑素含量.WIF-1基因可能抑制黑素生成.WIF-1基因表达降低可能通过非经典通路Wnt蛋白的综合作用激活JNK/MITF/TYR通路,最终促进黑素合成.

关键词：黑素细胞、紫外线、Wnt信号通路、细胞增殖、黑素合成

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资助基金：江苏省自然科学基金BK2012507

在线出版日期：2015-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：692-696