10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.05.007
梅毒螺旋体 Tp0844重组蛋白的表达、纯化及免疫反应性研究
目的:克隆、表达梅毒螺旋体重组蛋白 Tp0844,纯化表达产物并进行免疫反应性分析,筛选与宿主具有高反应性的 Tp 主要蛋白。方法通过生物信息学分析,获取 Tp0844基因序列,构建原核载体进行诱导表达;Ni-NTA 亲合层析柱纯化重组蛋白,Western 印迹法检测其重组蛋白与梅毒阴阳性血清的反应情况。结果成功构建 PET-30a(+)-Tp0844原核表达重组体,经诱导表达后发现该重组体可高表达出可溶性的重组蛋白,经亲和层析纯化后获得了相对分子质量为43000的重组蛋白;以梅毒 IgG 抗体阴、阳性血清为一抗,采用 Western 印迹法检测发现,Tp0844重组蛋白与梅毒阳性血清能发生明显特异反应,而与健康阴性血清未出现反应条带。结论可溶性重组表达的 Tp0844蛋白具有较好的免疫反应性,可作为梅毒发病机制研究的候选抗原。
苍白密螺旋体、重组蛋白质类、TP0844、免疫学、免疫反应性
国家自然科学基金81201331;湖南省自然科学基金11JJ4076;湖南省教育厅青年基金11B107
2015-05-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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