携人乳头瘤病毒6型全基因细胞的组织工程皮片培养的初步研究

摘要：

目的：建立人乳头瘤病毒6型（HPV6）全基因体外组织工程皮片培养模型，为进一步研究 HPV病毒周期奠定基础。方法用电转的方法，将 HPV6全长线性基因和质粒 pEGFP-▲EGFP 共转染 hTERT 细胞，G418抗性筛选，Southern 印迹法检测细胞内 HPV 病毒含量；3T3 J2滋养层细胞、I 型鼠尾胶原与含 HPV6基因的 hTERT 细胞（HPV6.hTERT 细胞）混合后，在金属网格上共同培养，逐渐形成皮片样结构。 HE 染色和免疫组化检测皮片的组织结构和 HPV6 L1蛋白表达，电镜检查皮片病毒颗粒。结果 HPV6全长线性基因成功转入 hTERT 细胞，Southern 印迹法检测细胞内含 HPV6 DNA；与3T3 J2细胞、I 型鼠尾胶原共同培养的 HPV6. hTERT 细胞随时间而增殖分化，逐渐形成具有疣状增生外观的皮片。皮片 HE 染色显示，培养7 d 即出现典型的皮肤分层结构；培养21 d 皮片可见明显乳头瘤样增生、空泡细胞、角化过度、角化不全等 HPV 感染组织病理表现。免疫组化显示皮片上部有 HPV6 L1蛋白表达。电镜检测发现皮片中存在 HPV6病毒颗粒。结论 HPV6全基因组织工程皮片培养模型为 HPV 的生物学研究提供了一个平台，但在应用上有一定的局限性。

关键词：人乳头状瘤病毒6、培养技术、病理学、病毒包膜蛋白质类、皮片培养

资助基金：江苏省自然科学基金BK2012748；教育部留学回国人员科研启动基金20121707；南京市科技发展项目201104028

在线出版日期：2015-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：321-325