体外鉴定衣原体质粒侵袭细胞相关毒力基因

摘要：

目的：比较几种转化沙眼衣原体鼠肺炎株（MoPn ）对宿主细胞的感染力，鉴定与衣原体质粒侵袭细胞相关的毒力基因。方法培养携带敲除了不同开放阅读框架（ORF）质粒的转化菌株，并不断扩增收集。测定浓度后，以相同菌量接种并按离心+二乙胺乙基葡聚糖（DEAE）、离心、DEAE、无任何处理4个条件分别对菌株进行处理，采用间接免疫荧光法计数包涵体数目；分别于（20、40、60 h）观察各菌株连续3代感染细胞后菌斑形成速度与面积。用 Lugol 碘染色观察各菌株包涵体内糖原合成情况。结果敲除质粒编码蛋白 Pgp4的菌株 pGFP：CMΔPgp4在4种条件下包涵体数目分别为（10.20±1.30）、（6.80±0.44）、（3.00±1.22）、（0.80±0.45）个，阴性对照组质粒缺失株 CMUT3包涵体数目分别为（6.40±0.89）、（3.80±0.83）、（1.60±0.89）、（0.60±0.54）个，同一条件下两者均表现出相近的感染力，包涵体数目均低于同一条件下其他菌株（均 P <0.01）。同一菌株不同条件下，包涵体数目差异有统计学意义（F =845.310，P <0.01），各菌株在离心+ DEAE 条件下包涵体数目最多；连续3代感染细胞时菌斑形成速度和大小均低于其他菌株；并有糖原累积的障碍。结论 Pgp4是衣原体质粒侵袭细胞相关的毒力基因之一。

关键词：沙眼衣原体、质粒、包涵体、毒力、基因、体外研究

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金81301469

在线出版日期：2015-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：307-311